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對(duì)ELISA試劑盒的實(shí)驗(yàn)性質(zhì)講說(shuō)

閱讀:307發(fā)布時(shí)間:2019-9-16

我公司技能部依據(jù)上市的ELISA試劑盒做出試驗(yàn)性質(zhì)總結(jié),在今日的技能內(nèi)容中分享給大家。我們知道,ELISA診斷試劑經(jīng)歷了從組成肽向基因工程抗原的過(guò)渡。因?yàn)榍笆返脑?,人們往往以反響本底的好壞?lái)衡量ELISA反響試劑盒,因而有些廠家為了堅(jiān)持較好的本底采用了單片段基因工程抗原及組成肽包被,該類(lèi)試劑盒的流行病學(xué)敏感度不行,穩(wěn)定性也成問(wèn)題。 
基因工程抗原與組成肽抗原的差異如下:

基因工程抗原是抗原基因在質(zhì)粒載體中原核或真核表達(dá)的蛋白質(zhì)抗原,多以大腸桿菌或 酵母 菌為表達(dá)體系。該類(lèi)抗原與組成肽比較具有以下特色:

一、分子量大
  組成肽采用化學(xué)辦法制備,因?yàn)楣に嚨南拗疲M成數(shù)量有限,只能達(dá)到數(shù)百個(gè)氨基酸;而利用基因工程制備的抗原,分子量更大。

二、穩(wěn)定性好
 包被的抗原的穩(wěn)定性可使 試劑 盒的效期得到確保,早期以組成肽為包被抗原的 試劑 盒效期只有3-4 個(gè)月,采用基因工程抗原后效期大大延長(zhǎng)了。

、純化難度大
    基因工程抗原的純化技能難度較大。
    組成多肽抗原是依據(jù)蛋白質(zhì)抗原分子的某一抗原決定簇的氨基酸序列人工組成的多肽片段。組成肽抗原有以下特色:①分子量太??;②一般只含有一個(gè)抗原決定簇;③純度高;④穩(wěn)定性差。
    國(guó)內(nèi)乙肝兩對(duì)半試劑廠家較多;不同廠家出產(chǎn)的試劑靈敏度與特異性存在一定的差別,資料顯現(xiàn),不同廠家試劑的特異性和敏感性分別為89.4%—99.3%,78%—89%存在較大差異。有的廠家酶標(biāo)板孔間A值差大于15%;標(biāo)記酶的活性及顯色液的穩(wěn)定比較差。使用質(zhì)劣的試劑必定導(dǎo)致成果的假陽(yáng)性或假陰性。因而。挑選高質(zhì)量的試劑是確保成果準(zhǔn)確的要害之一。


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