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ELISA操作步驟過程九要素

閱讀：428發(fā)布時間：2019-8-23

ELISA實驗過程中，操作過程中有一些易被人們忽視小細節(jié)，但這些小細節(jié)卻對實驗效果會發(fā)作直接影響。以下是ELISA控制操作過程的九點要素：

一、嚴格依照試劑說明書進行操作。操作前將試劑在室溫下平衡30～60min。

二、加樣后及時放人孵箱。標本較多時，要分批操作。按說明過程嚴峻控制操作時間，避免孵育時間人為延伸，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反響孔周圍，難以清洗*。

三、封板溫育時，各孔一定要封嚴，避免陽性標本的液體蒸騰，發(fā)作周邊現(xiàn)象然后導(dǎo)致“花板”的出現(xiàn)。

四、用洗板機洗板時，保證洗液注滿各孔，洗板針疏通，洗完板后在吸水紙(選擇潔凈、無或少塵的吸水資料)上輕輕拍干：還要避免針口有纖維蛋白或異物，這些異物在洗板的過程中易發(fā)作拖帶現(xiàn)象而導(dǎo)致“花板”的出現(xiàn)。

五、合理安排檢測量，以免反響板過多造成洗板等候時間長。

六、加酶試劑后用吸水紙在酶標板外表輕拭吸干。

七、顯色劑盡量在臨用前配制，堅持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用。

八、加樣時堅持顯色劑不外流；A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。加終止液時應(yīng)避免發(fā)作氣泡。

九、應(yīng)保證酶標板清潔，整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸。以上的辦法可以使“花板”降限。然后前進檢測的特異性。并得到更、牢靠的實驗效果。


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