我們知道，可以用作ELISA測定的標(biāo)本很廣泛，包含了體液、分泌物和排泄物等，均可作標(biāo)本以測定其中某種抗體或抗原成份。這些標(biāo)本收集的時刻、方法和保存都有必定的要求。今日上海通蔚生物為您解說：ELISA操作嚴(yán)格要求定當(dāng)做出好實驗。
按試劑盒闡明書的要求預(yù)備實驗中需用的試劑。ELISA頂用的蒸餾水或去離子水，包含用于洗刷的，應(yīng)為新鮮的和高質(zhì)量的。自配的緩沖液運用pH計丈量較正。從冰箱中取出的實驗用試劑應(yīng)待溫度與室溫平衡后運用。試劑盒中本次實驗不需用的部分應(yīng)及時放回冰箱保存。
試劑盒的制作：關(guān)于每種細胞因子應(yīng)仔細閱讀闡明書，留意每批的細節(jié)。在運用細胞因子前，瞬時離心試劑瓶，盡可能多地收回其中的細胞因子。根據(jù)每批闡明書中的細節(jié)，將凍干的細胞因子復(fù)溶。一般待測抗原標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性規(guī)模的可通過將標(biāo)準(zhǔn)品做8次2倍系列稀釋從2000pg/ml到15pg/ml?？衫脴?biāo)準(zhǔn)的ELISA操作流程、擴大試劑盒、第三類試劑、或改動酶底物系統(tǒng)可在必定規(guī)模內(nèi)進步靈敏度。為了優(yōu)化靈敏度，建議孵育標(biāo)準(zhǔn)品和標(biāo)本。若運用過氧化物酶作為顯色系統(tǒng)，應(yīng)嚴(yán)禁在洗液和稀釋液中加疊氮鈉，疊氮鈉可抑制過氧化物ELISA試劑盒酶的活性。
試劑盒的操作因固相載體的構(gòu)成不同而有所差異，國內(nèi)醫(yī)學(xué)檢驗一般均用板式點。
洗板方法：
① 手工洗板，吸去(不行觸及板壁)或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體；在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙，酶標(biāo)板朝下用力拍幾回；將推薦的洗刷緩沖液至少0.3ml注入孔內(nèi)，浸泡1-2分鐘，根據(jù)需要，重復(fù)此過程數(shù)次。
② 主動洗板，如果有主動洗板機，應(yīng)在嫻熟運用后再用到正式實驗過程中。
