銀染清除劑

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更新時間：2018-06-19 11:54:44瀏覽次數(shù)：322次

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上海聯(lián)邁生物工程有限公司

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產(chǎn)品簡介

銀染清除劑銀染是目前較靈敏的非同位素PAGE膠蛋白質(zhì)染色技術(shù)，對銀染后的條帶進行原位酶切（in-gel digestion）和后續(xù)MS分析是蛋白組學研究的重要手段。大量研究表明如果預先對銀染條帶進行去除銀粒子的處理，則原位酶切更加有效，MS靈敏度更高。目前較常用的脫銀粒子清除方法（如鐵氰酸鉀/硫代硫酸鈉法、硫酸銅/硫代硫酸鈉法）的主要缺點是引入的金屬離子會影響后續(xù)反應、有的成分還有毒性（如鐵氰酸鉀

詳細介紹

銀染清除劑

名稱	規(guī)格	價格	手冊
銀染清除劑	30次	1490元

銀染是目前靈敏的非同位素PAGE膠蛋白質(zhì)染色技術(shù)，對銀染后的條帶進行原位酶切（in-gel digestion）和后續(xù)MS分析是蛋白組學研究的重要手段。大量研究表明如果預先對銀染條帶進行去除銀粒子的處理，則原位酶切更加有效，MS靈敏度更高。目前常用的脫銀粒子清除方法（如鐵氰酸鉀/硫代硫酸鈉法、硫酸銅/硫代硫酸鈉法）的主要缺點是引入的金屬離子會影響后續(xù)反應、有的成分還有毒性（如鐵氰酸鉀）、工作液極不穩(wěn)定。為克服這些缺點，本公司開發(fā)了無毒環(huán)保的新型銀粒子清除劑，它具有下列特點：
1. 高效，5-10分鐘處理即可清除PAGE膠中銀染留下的銀粒子。
2. 成分不含金屬離子，跟原位酶切和質(zhì)譜分析（包括MALDI-TOF-MS）等后續(xù)反應高度兼容。
3. 成分無毒環(huán)保，保障研究人員和環(huán)境的安全。
4. 既可用于蛋白質(zhì)銀染后的脫銀，也可用于核酸銀染后的脫銀。
5. 即開即用，使用非常方便，不需要配制各種溶液。
RNA提取法：試劑中的主要成分為異硫氰酸胍和苯酚，其中異硫氰酸胍可裂解細胞，促使核蛋白體的解離，使RNA與蛋白質(zhì)分離，并將RNA釋放到溶液中。當加入氯時，它可抽提酸性的苯酚，而酸性苯酚可促使RNA進入水相，離心后可形成水相層和有機層，這樣RNA與仍留在有機相中的蛋白質(zhì)和DNA分離開。水相層(無色)主要為RNA，有機層(黃色)主要為DNA和蛋白質(zhì)。
實驗步驟：
1、RNA的提取;
2、反轉(zhuǎn)錄合成cDNA;
3、PCR擴增;
4、產(chǎn)物的電泳和結(jié)果的測定。
RT-PCR是將RNA的反轉(zhuǎn)錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈式擴增(PCR)相結(jié)合的技術(shù)。首先經(jīng)反轉(zhuǎn)錄酶的作用從RNA合成 cDNA，再以cDNA為模板，擴增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或兩步法的形式進行。在兩步法RT-PCR中，每一步都在zui條件下進行。
堿變性提取質(zhì)粒DNA是基于染色體DNA與質(zhì)粒DNA的變性與復性的差異而達到分離目的。在pH高達12.6的堿性條件下，染色體DNA的氫鍵斷裂，雙螺旋結(jié)構(gòu)解開而變性。質(zhì)粒DNA的大部分氫鍵也斷裂，但超螺旋共價閉合環(huán)狀的兩條互補鏈不會*分離，當以pH4.8的NaAc高鹽緩沖液去調(diào)節(jié)其pH至中性時，變性的質(zhì)粒DNA又恢復原來的構(gòu)型，保存在溶液中，而染色體DNA不能復性而形成纏連的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，通過離心，染色體DNA與不穩(wěn)定的大分子RNA、蛋白質(zhì)-SDS復合物等一起沉淀下來而被除去。
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