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細(xì)胞培養(yǎng)基

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產(chǎn)品型號(hào)

品       牌

廠商性質(zhì)生產(chǎn)商

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更新時(shí)間:2018-06-25 16:30:59瀏覽次數(shù):824次

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產(chǎn)品簡介

細(xì)胞培養(yǎng)基GAL指示劑培養(yǎng)基GAL指示劑培養(yǎng)基是一種用來記錄半乳糖發(fā)酵能力的培養(yǎng)基,可以實(shí)時(shí)監(jiān)測發(fā)酵過程產(chǎn)生半乳糖的能力。本產(chǎn)品為優(yōu)化的MAL指示劑培養(yǎng)基,包含有菌株所需要的全部營養(yǎng)成分和指示劑,即開即用,方便使用。

詳細(xì)介紹

 

細(xì)胞培養(yǎng)基

既是培養(yǎng)細(xì)胞中供給細(xì)胞營養(yǎng)和促使細(xì)胞生殖增殖的基礎(chǔ)物質(zhì),也是培養(yǎng)細(xì)胞生長和繁殖的生存環(huán)境。

合成培養(yǎng)基

1951年厄爾開發(fā)了供動(dòng)物細(xì)胞體外生長的人工合成培養(yǎng)基(MEM)。合成培養(yǎng)基的種類相當(dāng)多。合成培養(yǎng)基成分已知,便于對(duì)實(shí)驗(yàn)條件的控制。但與天然培養(yǎng)基相比,有些天然的未知成分尚無法用已知的化學(xué)成分所替代,因此,細(xì)胞培養(yǎng)中使用的基礎(chǔ)合成培養(yǎng)基還必須加入一定量的天然培養(yǎng)基成分,以克服合成培養(yǎng)基的不足。普遍的作法是加入小牛血清。

動(dòng)物血清成分復(fù)雜,各種生物大小分子混合在一起,有些成分至今尚未搞清楚。血清對(duì)細(xì)胞生長很有效,但后期對(duì)培養(yǎng)產(chǎn)物的分離、提純以及檢測造會(huì)成一定困難。另外高質(zhì)量的動(dòng)物血清來源有限,成本高,限制了它的大量使用。

無血清培養(yǎng)基不加動(dòng)物血清,在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中加入細(xì)胞生長有效因子,激素等。

是一種用來記錄半乳糖發(fā)酵能力的培養(yǎng)基,可以實(shí)時(shí)監(jiān)測發(fā)酵過程產(chǎn)生半乳糖的能力。本產(chǎn)品為優(yōu)化的MAL指示劑培養(yǎng)基,包含有菌株所需要的全部營養(yǎng)成分和指示劑,即開即用,方便使用。
RNA提取法:試劑中的主要成分為異硫氰酸胍和苯酚,其中異硫氰酸胍可裂解細(xì)胞,促使核蛋白體的解離,使RNA與蛋白質(zhì)分離,并將RNA釋放到溶液中。當(dāng)加入氯時(shí),它可抽提酸性的苯酚,而酸性苯酚可促使RNA進(jìn)入水相,離心后可形成水相層和有機(jī)層,這樣RNA與仍留在有機(jī)相中的蛋白質(zhì)和DNA分離開。水相層(無色)主要為RNA,有機(jī)層(黃色)主要為DNA和蛋白質(zhì)。

細(xì)胞培養(yǎng)基實(shí)驗(yàn)步驟
1、RNA的提取;
2、反轉(zhuǎn)錄合成cDNA;
3、PCR擴(kuò)增;
4、產(chǎn)物的電泳和結(jié)果的測定。
RT-PCR是將RNA的反轉(zhuǎn)錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈?zhǔn)綌U(kuò)增(PCR)相結(jié)合的技術(shù)。首先經(jīng)反轉(zhuǎn)錄酶的作用從RNA合成 cDNA,再以cDNA為模板,擴(kuò)增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或兩步法的形式進(jìn)行。在兩步法RT-PCR中,每一步都在zui條件下進(jìn)行。
堿變性提取質(zhì)粒DNA是基于染色體DNA與質(zhì)粒DNA的變性與復(fù)性的差異而達(dá)到分離目的。在pH高達(dá)12.6的堿性條件下,染色體DNA的氫鍵斷裂,雙螺旋結(jié)構(gòu)解開而變性。質(zhì)粒DNA的大部分氫鍵也斷裂,但超螺旋共價(jià)閉合環(huán)狀的兩條互補(bǔ)鏈不會(huì)*分離,當(dāng)以pH4.8的NaAc高鹽緩沖液去調(diào)節(jié)其pH至中性時(shí),變性的質(zhì)粒DNA又恢復(fù)原來的構(gòu)型,保存在溶液中,而染色體DNA不能復(fù)性而形成纏連的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),通過離心,染色體DNA與不穩(wěn)定的大分子RNA、蛋白質(zhì)-SDS復(fù)合物等一起沉淀下來而被除去。
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