當(dāng)前位置：上海聯(lián)邁生物工程有限公司>>分子生物學(xué)>>克隆及表達(dá)產(chǎn)品>>一站式TA克隆試劑盒（含感受態(tài)）

一站式TA克隆試劑盒（含感受態(tài)）

返回列表頁(yè)

參考價(jià)

面議

具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

產(chǎn)品型號(hào)

品牌

廠商性質(zhì)生產(chǎn)商

所在地上海市

在線詢價(jià) 收藏產(chǎn)品查看聯(lián)系電話

聯(lián)系方式：周經(jīng)理查看聯(lián)系方式

更新時(shí)間：2018-06-14 13:43:45瀏覽次數(shù)：261次

聯(lián)系我時(shí)，請(qǐng)告知來(lái)自環(huán)保在線

產(chǎn)品分類 品牌分類

  分子生物學(xué)

重組蛋白

工具酶

基因結(jié)構(gòu)和功能研究產(chǎn)品

細(xì)胞生物學(xué)研究產(chǎn)品

蛋白質(zhì)研究產(chǎn)品

克隆及表達(dá)產(chǎn)品

核酸擴(kuò)增產(chǎn)品

探針標(biāo)記及檢測(cè)產(chǎn)品

核酸電泳及回收產(chǎn)品

DNA純化產(chǎn)品

RNA純化產(chǎn)品

全部產(chǎn)品列表

暫無(wú)信息

上海聯(lián)邁生物工程有限公司

經(jīng)營(yíng)模式：生產(chǎn)廠家

商鋪產(chǎn)品：2964條

所在地區(qū)：上海上海市

聯(lián)系人：周經(jīng)理（銷售經(jīng)理）

詢價(jià) 給他留言

產(chǎn)品簡(jiǎn)介

一站式TA克隆試劑盒（含感受態(tài)）AT克隆就是利用T載體兩個(gè)3'端各帶有一個(gè)T突出，而PCR擴(kuò)增產(chǎn)物兩個(gè)3'端各帶有一個(gè)A突出的特點(diǎn)，在DNA連接酶的作用下，將PCR產(chǎn)物克隆到T載體中的過(guò)程，它是克隆PCR擴(kuò)增產(chǎn)物的主要手段。本產(chǎn)品提供了完成AT克隆的所有成份，具有下列特點(diǎn)：
1. 一站式，用戶只需要準(zhǔn)備PCR產(chǎn)物即可進(jìn)行AT克隆。

詳細(xì)介紹

一站式TA克隆試劑盒(含感受態(tài))

名稱	規(guī)格	價(jià)格	手冊(cè)
一站式TA克隆試劑盒(含感受態(tài))	20次	詢價(jià)

AT克隆就是利用T載體兩個(gè)3'端各帶有一個(gè)T突出，而PCR擴(kuò)增產(chǎn)物兩個(gè)3'端各帶有一個(gè)A突出的特點(diǎn)，在DNA連接酶的作用下，將PCR產(chǎn)物克隆到T載體中的過(guò)程，它是克隆PCR擴(kuò)增產(chǎn)物的主要手段。本產(chǎn)品提供了完成AT克隆的所有成份，具有下列特點(diǎn)：

1. 一站式，用戶只需要準(zhǔn)備一站式TA克隆試劑盒(含感受態(tài))PCR產(chǎn)物即可進(jìn)行AT克隆。

2. T載體由XcmI酶切方法制備，兩個(gè)5'端100%含T突出，自連率幾乎為零。

3. 克隆效率高，一次AT克隆實(shí)驗(yàn)一般能得到上百個(gè)重組子。

4. 陽(yáng)性率高，一般能到90%以上，大大縮短了篩選工作。

5. 提供供兩次實(shí)驗(yàn)用的對(duì)照插入片段，方便分析實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。

6. 插入位點(diǎn)兩側(cè)有對(duì)稱的常見(jiàn)酶切位點(diǎn)（如BstZI、EcoRI、NotI），便于對(duì)克隆的PCR片段進(jìn)行近一步的分析。

7. 克隆位點(diǎn)兩側(cè)分別有T7和SP6 RNA聚合酶啟動(dòng)子，便于用克隆的PCR片段制備RNA探針。

8. 可以使用pUC/M13 Forward和Reverse測(cè)序引物測(cè)定插入片段的序列。

9. T克隆位點(diǎn)位于β-半乳糖苷酶的α-肽編碼區(qū)內(nèi)，可以進(jìn)行藍(lán)白斑篩選。

10. 含有絲狀噬菌體f1 復(fù)制起始子，可以制備單鏈DNA。

RNA提取法：試劑中的主要成分為異硫氰酸胍和苯酚，其中異硫氰酸胍可裂解細(xì)胞，促使核蛋白體的解離，使RNA與蛋白質(zhì)分離，并將RNA釋放到溶液中。當(dāng)加入氯時(shí)，它可抽提酸性的苯酚，而酸性苯酚可促使RNA進(jìn)入水相，一站式TA克隆試劑盒(含感受態(tài))離心后可形成水相層和有機(jī)層，這樣RNA與仍留在有機(jī)相中的蛋白質(zhì)和DNA分離開(kāi)。水相層(無(wú)色)主要為RNA，有機(jī)層(黃色)主要為DNA和蛋白質(zhì)。
實(shí)驗(yàn)步驟：
1、RNA的提取;
2、反轉(zhuǎn)錄合成cDNA;
3、PCR擴(kuò)增;
4、產(chǎn)物的電泳和結(jié)果的測(cè)定。
RT-PCR是將RNA的反轉(zhuǎn)錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈?zhǔn)綌U(kuò)增(PCR)相結(jié)合的技術(shù)。首先經(jīng)反轉(zhuǎn)錄酶的作用從RNA合成 cDNA，再以cDNA為模板，擴(kuò)增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或兩步法的形式進(jìn)行。在兩步法RT-PCR中，每一步都在zui條件下進(jìn)行。
堿變性提取質(zhì)粒DNA是基于染色體DNA與質(zhì)粒DNA的變性與復(fù)性的差異而達(dá)到分離目的。在pH高達(dá)12.6的堿性條件下，染色體DNA的氫鍵斷裂，雙螺旋結(jié)構(gòu)解開(kāi)而變性。質(zhì)粒DNA的大部分氫鍵也斷裂，但超螺旋共價(jià)閉合環(huán)狀的兩條互補(bǔ)鏈不會(huì)*分離，當(dāng)以pH4.8的NaAc高鹽緩沖液去調(diào)節(jié)其pH至中性時(shí)，變性的質(zhì)粒DNA又恢復(fù)原來(lái)的構(gòu)型，保存在溶液中，而染色體DNA不能復(fù)性而形成纏連的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，通過(guò)離心，染色體DNA與不穩(wěn)定的大分子RNA、蛋白質(zhì)-SDS復(fù)合物等一起沉淀下來(lái)而被除去。
一站式TA克隆試劑盒(含感受態(tài))相關(guān)產(chǎn)品列表：