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一步法大提質(zhì)粒DNAout

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更新時間：2018-06-11 21:08:20瀏覽次數(shù)：269次

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產(chǎn)品簡介

一步法大提質(zhì)粒DNAout本產(chǎn)品是在LMAI Bio一步裂解式質(zhì)粒DNAOUT（CAT#70903）基礎(chǔ)上開發(fā)的、能夠快速從100 mL左右的E.coli培養(yǎng)液中取質(zhì)粒DNA的產(chǎn)品。它只需要一種溶液即可以完成細(xì)菌裂解，并且裂解物可以直接上柱純化質(zhì)粒DNA。它比經(jīng)典的堿變性質(zhì)粒制備方法更加快捷和方便。本產(chǎn)品的主要特點是：
1. 快速，整個質(zhì)粒DNA提取過程只需要不到30分鐘，比傳統(tǒng)的堿變性方法快捷。

詳細(xì)介紹

 

一步法大提質(zhì)粒DNAout

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規(guī)格

價格

手冊

一步法大提質(zhì)粒DNAout

5次

590元

 

本產(chǎn)品是在LMAI Bio一步裂解式質(zhì)粒DNAOUT（CAT#70903）基礎(chǔ)上開發(fā)的、能夠快速從100 mL左右的E.coli培養(yǎng)液中取質(zhì)粒DNA的產(chǎn)品。它只需要一種溶液即可以完成細(xì)菌裂解，并且裂解物可以直接上柱純化質(zhì)粒DNA。它比經(jīng)典的堿變性質(zhì)粒制備方法更加快捷和方便。本產(chǎn)品的主要特點是：
1. 快速，整個質(zhì)粒DNA提取過程只需要不到30分鐘，比傳統(tǒng)的堿變性方法快捷。
2. 超螺旋比例高，*的非堿法一步法細(xì)菌裂解技術(shù)，避免了強堿對DNA的損害，得到的質(zhì)粒DNA切口更少。
3. DNA純度高，幾乎沒有基因組DNA和RNA污染，OD260/280一般在1.7-1.9之間。
4. DNA可以直接用于電泳、酶切、PCR、細(xì)菌轉(zhuǎn)化、分子克隆等實驗。
5. 大吸附量為600 μg DNA，具體產(chǎn)率取決于質(zhì)粒拷貝數(shù)。
6. 過程簡單，重復(fù)性和穩(wěn)定性好。
RNA提取法：試劑中的主要成分為異硫氰酸胍和苯酚，其中異硫氰酸胍可裂解細(xì)胞，促使核蛋白體的解離，使RNA與蛋白質(zhì)分離，并將RNA釋放到溶液中。當(dāng)加入氯時，它可抽提酸性的苯酚，而酸性苯酚可促使RNA進(jìn)入水相，離心后可形成水相層和有機(jī)層，這樣RNA與仍留在有機(jī)相中的蛋白質(zhì)和DNA分離開。水相層(無色)主要為RNA，有機(jī)層(黃色)主要為DNA和蛋白質(zhì)。
實驗步驟：
1、RNA的提取;
2、反轉(zhuǎn)錄合成cDNA;
3、PCR擴(kuò)增;
4、產(chǎn)物的電泳和結(jié)果的測定。
RT-PCR是將RNA的反轉(zhuǎn)錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈?zhǔn)綌U(kuò)增(PCR)相結(jié)合的技術(shù)。首先經(jīng)反轉(zhuǎn)錄酶的作用從RNA合成 cDNA，再以cDNA為模板，擴(kuò)增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或兩步法的形式進(jìn)行。在兩步法RT-PCR中，每一步都在zui條件下進(jìn)行。
堿變性提取質(zhì)粒DNA是基于染色體DNA與質(zhì)粒DNA的變性與復(fù)性的差異而達(dá)到分離目的。在pH高達(dá)12.6的堿性條件下，染色體DNA的氫鍵斷裂，雙螺旋結(jié)構(gòu)解開而變性。質(zhì)粒DNA的大部分氫鍵也斷裂，但超螺旋共價閉合環(huán)狀的兩條互補鏈不會*分離，當(dāng)以pH4.8的NaAc高鹽緩沖液去調(diào)節(jié)其pH至中性時，變性的質(zhì)粒DNA又恢復(fù)原來的構(gòu)型，保存在溶液中，而染色體DNA不能復(fù)性而形成纏連的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，通過離心，染色體DNA與不穩(wěn)定的大分子RNA、蛋白質(zhì)-SDS復(fù)合物等一起沉淀下來而被除去。
相關(guān)產(chǎn)品列表：
Acetate Buffer（乙酸緩沖液），1M,pH5.0  
Acetate Buffer（乙酸緩沖液），1M,pH5.5  
Acrylamide Solution（丙烯酰胺溶液），30% 
Acrylamide Solution（丙烯酰胺溶液），40%
Acrylamide: Bis-acrylamide Solution（丙烯酰胺-甲叉雙丙烯酰胺溶液），19:1  
Acrylamide: Bis-acrylamide Solution（丙烯酰胺-甲叉雙丙烯酰胺溶液），29:1  
Acrylamide: Bis-acrylamide Solution（丙烯酰胺-甲叉雙丙烯酰胺溶液），37.5:1 


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