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更新時間:2018-06-11 20:47:45瀏覽次數(shù):266次
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柱式軟體動物DNAout本產(chǎn)品是專門用于從各種軟體動物組織中提取基因組DNA的試劑盒。其原理是基于陽離子去垢劑CTAB在適當(dāng)?shù)碾x子強度條件下,特異地跟基因組DNA結(jié)合形成沉淀,然后在用硅膠膜技術(shù)進(jìn)行進(jìn)一步純化。本產(chǎn)品具有下列特點:
1. 適用于用常規(guī)方法難以提取的、各種富含多糖的軟體動物動物,包括螺類、貝類、烏賊、章魚和蝸牛等。
柱式軟體動物DNAout
名稱 | 規(guī)格 | 價格 | 手冊 |
柱式軟體動物DNAout | 50支 | 詢價 |
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本產(chǎn)品是專門用于從各種軟體動物組織中提取基因組DNA的試劑盒。其原理是基于陽離子去垢劑CTAB在適當(dāng)?shù)碾x子強度條件下,特異地跟基因組DNA結(jié)合形成沉淀,然后在用硅膠膜技術(shù)進(jìn)行進(jìn)一步純化。本產(chǎn)品具有下列特點:
1. 適用于用常規(guī)方法難以提取的、各種富含多糖的軟體動物動物,包括螺類、貝類、烏賊、章魚和蝸牛等。
2. 提取到的基因組DNA完整性,其中zui長可以到達(dá)長度一般在20-50kb。
3. DNA純凈,OD260/280一般都在1.9左右、DNA片段大小在30-50 Kb左右,可直接用于PCR、酶切、雜交等。
4. 操作簡單,整個過程約30分鐘。
5. 安全無毒,本試劑盒對人體無毒,無腐蝕性和刺激性氣味。
6. 價廉物美,與國外同類產(chǎn)品相比質(zhì)量相當(dāng),但價格便宜。
RNA提取法:試劑中的主要成分為異硫氰酸胍和苯酚,其中異硫氰酸胍可裂解細(xì)胞,促使核蛋白體的解離,使RNA與蛋白質(zhì)分離,并將RNA釋放到溶液中。當(dāng)加入氯時,它可抽提酸性的苯酚,而酸性苯酚可促使RNA進(jìn)入水相,離心后可形成水相層和有機層,這樣RNA與仍留在有機相中的蛋白質(zhì)和DNA分離開。水相層(無色)主要為RNA,有機層(黃色)主要為DNA和蛋白質(zhì)。
實驗步驟:
1、RNA的提取;
2、反轉(zhuǎn)錄合成cDNA;
3、PCR擴增;
4、產(chǎn)物的電泳和結(jié)果的測定。
RT-PCR是將RNA的反轉(zhuǎn)錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈?zhǔn)綌U增(PCR)相結(jié)合的技術(shù)。首先經(jīng)反轉(zhuǎn)錄酶的作用從RNA合成 cDNA,再以cDNA為模板,擴增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或兩步法的形式進(jìn)行。在兩步法RT-PCR中,每一步都在zui條件下進(jìn)行。
堿變性提取質(zhì)粒DNA是基于染色體DNA與質(zhì)粒DNA的變性與復(fù)性的差異而達(dá)到分離目的。在pH高達(dá)12.6的堿性條件下,染色體DNA的氫鍵斷裂,雙螺旋結(jié)構(gòu)解開而變性。質(zhì)粒DNA的大部分氫鍵也斷裂,但超螺旋共價閉合環(huán)狀的兩條互補鏈不會*分離,當(dāng)以pH4.8的NaAc高鹽緩沖液去調(diào)節(jié)其pH至中性時,變性的質(zhì)粒DNA又恢復(fù)原來的構(gòu)型,保存在溶液中,而染色體DNA不能復(fù)性而形成纏連的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),通過離心,染色體DNA與不穩(wěn)定的大分子RNA、蛋白質(zhì)-SDS復(fù)合物等一起沉淀下來而被除去。
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