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更新時(shí)間：2018-05-28 14:00:24瀏覽次數(shù)：284次
聯(lián)系我時(shí)，請告知來自 環(huán)保在線P19小鼠畸胎瘤細(xì)胞（STR鑒定）加拿大渥太華大學(xué)的Mc Burney 等在1982 年從雄性小鼠畸胎瘤中分離得到的 , 是一種能夠在體外培養(yǎng)的多能干細(xì)胞, P19 細(xì)胞團(tuán)經(jīng)RA 誘導(dǎo)可分化成神經(jīng)元、膠質(zhì)細(xì)胞和纖維母細(xì)胞; 而經(jīng)二甲基亞砜（DM SO ） 誘導(dǎo)則分化成心肌、骨骼肌和平滑肌細(xì)胞;在P19細(xì)胞向神經(jīng)元分化的過程中，神經(jīng)發(fā)育相關(guān)基因的表
英文名稱:Mouse Teratoma Cells
P19小鼠畸胎瘤細(xì)胞（STR鑒定）
英文名稱：Mouse Teratoma Cells
規(guī)格：1*10 6
細(xì)胞介紹
加拿大渥太華大學(xué)的Mc Burney 等在1982 年從雄性小鼠畸胎瘤中分離得到的 , 是一種能夠在體外培養(yǎng)的多能干細(xì)胞, P19 細(xì)胞團(tuán)經(jīng)RA 誘導(dǎo)可分化成神經(jīng)元、膠質(zhì)細(xì)胞和纖維母細(xì)胞; 而經(jīng)二甲基亞砜(DM SO ) 誘導(dǎo)則分化成心肌、骨骼肌和平滑肌細(xì)胞;在P19細(xì)胞向神經(jīng)元分化的過程中，神經(jīng)發(fā)育相關(guān)基因的表達(dá)模式基本模擬了正常小鼠神經(jīng)發(fā)育過程, 因此, P19 目前被用作一個(gè)研究神經(jīng)發(fā)育的體外模型。P19 細(xì)胞作為研究神經(jīng)分化機(jī)制的模型, 顯著區(qū)別于其他細(xì)胞系的四大特點(diǎn)是: ①它具有正常小鼠的二倍體核型, 細(xì)胞分裂快, 可在體外迅速大量擴(kuò)增, 多次傳代也不喪失其分化能力。②P19 細(xì)胞具有多種分化潛力, 不同誘導(dǎo)條件下可定向分化成不同類型的細(xì)胞, 種植到孕鼠囊胚中能分化成多種類型細(xì)胞。③根據(jù)P19 細(xì)胞誘導(dǎo)分化分階段進(jìn)行的特點(diǎn), 能將神經(jīng)分化的早期機(jī)制與參與突起延伸的機(jī)制分開研究。④該細(xì)胞易于轉(zhuǎn)染, 且轉(zhuǎn)染后仍能正常分化, 適于進(jìn)行細(xì)胞基因研究。通過轉(zhuǎn)染正?；蛲蛔兊哪康幕? 增強(qiáng)或抑制它們的表達(dá)水平可用于研究這些基因在神經(jīng)分化中的作用。另外, 利用反義RNA 阻斷內(nèi)源蛋白的表達(dá), 可用來觀察這些蛋白在神經(jīng)分化中的作用。
一、細(xì)胞特性
1） 來源：胚胎；畸胎癌
2） 形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
3） 含量：>1x106 個(gè)/mL
4） 污染：支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測為陰性
5） 規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝
二、細(xì)胞收到后處理
P19小鼠畸胎瘤細(xì)胞（STR鑒定）在培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿*培養(yǎng)液并封好瓶口是細(xì)胞運(yùn)輸?shù)霓k法。收到細(xì)胞回到自己的實(shí)驗(yàn)室后，先打開外包裝，用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超凈臺(tái)內(nèi)，嚴(yán)格無菌操作。鏡下觀察：未超過80%匯合度時(shí)，可將瓶裝的*培養(yǎng)液移入廢液缸中，原瓶（T25瓶）保留6-8ml*培養(yǎng)液，懸浮細(xì)胞需離心處理，放入37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)；超過80%匯合度時(shí)，根據(jù)情況傳代或者凍存，具體操作見細(xì)胞培養(yǎng)步驟。
三、細(xì)胞培養(yǎng)步驟
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中，加入約6ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1、對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
2、對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集，1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，進(jìn)行離心收集，1000RPM條件下離心5分鐘，去除上清，按凍存數(shù)量加入血清及DMSO，凍存比例為90%FBS+10%DMSO。
出現(xiàn)問題，可重發(fā)的情況有哪些？判定標(biāo)準(zhǔn)是什么？
（1）細(xì)胞運(yùn)輸途中遭遇的各種問題，細(xì)胞丟失、破損、漏液等，重發(fā)；
★ 注：如運(yùn)輸過程中導(dǎo)致細(xì)胞污染或者死亡，我們將無條件補(bǔ)發(fā) 收貨后十個(gè)工作日內(nèi)有其他問題提供照片可半價(jià)重發(fā)。
相關(guān)細(xì)胞系列表：
HCS-2/8 ；人軟骨肉瘤細(xì)胞 1×10^6 cells/瓶
Su-DHL-6 ；人B細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞 1×10^6 cells/瓶
HPDE6-C7(HPDE6-C7) ;人正常胰腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞 1×10^6 cells/瓶
HIEC ；正常人腸上皮細(xì)胞 1×10^6 cells/瓶
HMEC-1 ；人微血管內(nèi)皮細(xì)胞株 1×10^6 cells/瓶
T98G(T98-G) ；人腦膠質(zhì)細(xì)胞瘤 1×10^6 cells/瓶
SNU-869 ；人膽管癌細(xì)胞 1×10^6 cells/瓶
LN-18(LN18)；人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞 1×10^6 cells/瓶
HIC ；人小腸癌細(xì)胞 1×10^6 cells/瓶
VSC4.1 ；脊髓前角運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元瘤細(xì)胞系 1×10^6 cells/瓶
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