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上海聯(lián)邁生物工程有限公司
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產(chǎn)品型號(hào)
品 牌
廠商性質(zhì)生產(chǎn)商
所 在 地上海市
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更新時(shí)間：2018-05-25 14:45:41瀏覽次數(shù)：508次
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經(jīng)營(yíng)模式：生產(chǎn)廠家
商鋪產(chǎn)品：2964條
所在地區(qū)：上海上海市
聯(lián)系人：周經(jīng)理 （銷(xiāo)售經(jīng)理）
Hkb20人腎上皮細(xì)胞（STR鑒定）
Hkb20人腎上皮細(xì)胞（STR鑒定）
英文名稱(chēng)：
規(guī)格：1*10 6
細(xì)胞介紹
一、細(xì)胞特性
二、細(xì)胞收到后處理
Hkb20人腎上皮細(xì)胞（STR鑒定）在培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿*培養(yǎng)液并封好瓶口是細(xì)胞運(yùn)輸?shù)霓k法。收到細(xì)胞回到自己的實(shí)驗(yàn)室后，先打開(kāi)外包裝，用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超凈臺(tái)內(nèi)，嚴(yán)格無(wú)菌操作。鏡下觀察：未超過(guò)80%匯合度時(shí)，可將瓶裝的*培養(yǎng)液移入廢液缸中，原瓶（T25瓶）保留6-8ml*培養(yǎng)液，懸浮細(xì)胞需離心處理，放入37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)；超過(guò)80%匯合度時(shí)，根據(jù)情況傳代或者凍存，具體操作見(jiàn)細(xì)胞培養(yǎng)步驟。
三、細(xì)胞培養(yǎng)步驟
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中，加入約6ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1、對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
2、對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集，1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，進(jìn)行離心收集，1000RPM條件下離心5分鐘，去除上清，按凍存數(shù)量加入血清及DMSO，凍存比例為90%FBS+10%DMSO。
出現(xiàn)問(wèn)題，可重發(fā)的情況有哪些？判定標(biāo)準(zhǔn)是什么？
（1）細(xì)胞運(yùn)輸途中遭遇的各種問(wèn)題，細(xì)胞丟失、破損、漏液等，重發(fā)；
★ 注：如運(yùn)輸過(guò)程中導(dǎo)致細(xì)胞污染或者死亡，我們將無(wú)條件補(bǔ)發(fā) 收貨后十個(gè)工作日內(nèi)有其他問(wèn)題提供照片可半價(jià)重發(fā)。
相關(guān)細(xì)胞系列表：
暫不供應(yīng)HeLa人細(xì)胞（干細(xì)胞庫(kù)保藏） 人源 1×10^6 細(xì)胞數(shù)/ml
Hepa 1-6小鼠肝癌細(xì)胞（復(fù)蘇包郵） 小鼠源 1×10^6 細(xì)胞數(shù)/ml
P815小鼠肥大細(xì)胞瘤細(xì)胞（復(fù)蘇包郵） 小鼠源 1×10^6 細(xì)胞數(shù)/ml
PC-12（未分化）大鼠嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞（未分化）（復(fù)蘇包郵） 大鼠源 1×10^6 細(xì)胞數(shù)/ml
MIA PaCa-2人胰腺癌細(xì)胞 人源 1×10^6 細(xì)胞數(shù)/ml
FHs 74 Int人小腸上皮細(xì)胞（2015年新引進(jìn)）（干細(xì)胞庫(kù)保藏） 人源 1×10^6 細(xì)胞數(shù)/ml
2342323423 1×10^6 細(xì)胞數(shù)/ml
【引進(jìn)中，暫不對(duì)外提供】人乳腺細(xì)胞MCF 10A（SCSP-575）*培養(yǎng)液一套人乳腺細(xì)胞MCF 10A（SCSP-575）*培養(yǎng)液一套 1×10^6 細(xì)胞數(shù)/ml
【暫不供應(yīng)】Matrigel （濃度5%）基質(zhì)膠（濃度5%），10ml/支 1×10^6 細(xì)胞數(shù)/ml
【引進(jìn)中，暫不對(duì)外提供】K-sfm培養(yǎng)液套裝一套人腎上皮細(xì)胞HK-2（SCSP-511）和人前列腺細(xì)胞RWPE-1（SCSP-5025）*培養(yǎng)液K-sfm一套 1×10^6 細(xì)胞數(shù)/ml
【暫不對(duì)外提供】小鼠肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞AML12*培養(yǎng)液一套（550ml）小鼠肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞AML12*培養(yǎng)液一套 1×10^6 細(xì)胞數(shù)/ml
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