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利用磷酸化蛋白質(zhì)組學(xué)闡明阿片類藥物在大腦中激活的信號通路

閱讀：984發(fā)布時間：2018-6-28

利用磷酸化蛋白質(zhì)組學(xué)闡明阿片類藥物在大腦中激活的信號通路
2018年6月28日--阿片類藥物是作用于大腦中的強效止痛藥，但它們具有一系列有害的副作用，包括成癮。在一項新的研究中，來自德國馬克斯-普朗克生物化學(xué)研究所（MPIB）；奧地利因斯布魯克醫(yī)科大學(xué)、因斯布魯克大學(xué)；美國天普大學(xué)和丹麥哥本哈根大學(xué)的研究人員開發(fā)出一種工具，從而能夠更加深入地認識大腦對阿片類藥物作出的反應(yīng)。他們利用質(zhì)譜法確定了大腦的五個不同區(qū)域中的蛋白磷酸化---蛋白的分子開關(guān)---模式發(fā)生的變化，并將它們對應(yīng)到阿片類藥物的期望的和不希望的治療效果。這些結(jié)果將為鑒定新的藥物靶點和設(shè)計一類副作用較少的新型止痛藥提供方法。相關(guān)研究結(jié)果發(fā)表在2018年6月22日的Science期刊上，論文標(biāo)題為“In vivo brain GPCR signaling elucidated by phosphoproteomics”。
 

 

細胞用來響應(yīng)外部刺激的級聯(lián)信號類似于公司的指揮鏈。一個受體（好比于公司的領(lǐng)導(dǎo)）的激活給細胞內(nèi)的其他蛋白（好比是一群下屬）提供指令。這種信息通過其他的相互作用蛋白質(zhì)的信號級聯(lián)傳遞到較低級別的組織結(jié)構(gòu)。就像執(zhí)行不同任務(wù)以保持公司運行的員工一樣，蛋白也是執(zhí)行細胞大部分功能的分子機器。在細胞中，通過改變這些“細胞員工”的功能，指令被傳遞給其他的蛋白。一種改變功能的方式是“磷酸化”---將一個磷酸分子連接到蛋白上。通過同時分析所有的這些分子開關(guān)，就能夠確定細胞或器官中的信號通路活性。相比于研究DNA，即在所有細胞中幾乎相同的遺傳“藍圖”，研究這種指揮鏈可更加地了解細胞內(nèi)當(dāng)前發(fā)生的過程。

蛋白活性圖譜

馬克斯-普朗克生物化學(xué)研究所主任Matthias Mann及其團隊利用質(zhì)譜法（一種確定樣品中蛋白的身份和數(shù)量的方法）描述了許多器官樣品中成千種蛋白的磷酸化模式，為此，他們發(fā)明了一個術(shù)語，即磷酸化蛋白質(zhì)組學(xué)（phosphoproteomics）。在近的一項研究中，他們分析了大腦不同區(qū)域中的對阿片類藥物作出反應(yīng)的信號通路激活。為了實現(xiàn)這一目標(biāo)，他們使用了近開發(fā)的一種被稱作EasyPhos的方法。

為了理解阿片類藥物如何起作用，人們必須了解它們對大腦的影響。論文作者Jeffrey Liu說，“利用磷酸化蛋白質(zhì)組學(xué)，我們一次能夠分析50000多個磷酸化位點，并獲取大腦樣品中所有有活性的信號通路圖譜。我們發(fā)現(xiàn)在接觸阿片類藥物后1000多種信號通路發(fā)生變化，這顯示出這些藥物對大腦中的信號通路的全局影響。”之前的方法不能大規(guī)模地捕獲蛋白磷酸化，并且遺漏了許多重要的已開啟或關(guān)閉的信號通路。

磷酸化蛋白質(zhì)組學(xué)---一種多功能的工具

Liu說，“在我們的研究中，我們研究了大腦中負責(zé)導(dǎo)致阿片類藥物發(fā)揮止痛等效果的信號通路激活。相反之下，其他信號通路的平行激活會導(dǎo)致不良副作用。”

這些研究人員使用磷酸化蛋白質(zhì)組學(xué)來測量這些導(dǎo)致有益效果和副作用的信號通路的活躍程度。來自因斯布魯克醫(yī)科大學(xué)的與Liu和Mann合作開展這項研究的Christoph Schwarzer，著重關(guān)注阿片類藥物在大腦中激活的這些級聯(lián)信號。在開發(fā)新藥期間，這些數(shù)據(jù)可用于鑒定出具有強大治療效果且較少副作用的潛在物質(zhì)。此外，這項研究還顯示了通過干擾級聯(lián)信號降低副作用的前景。因此，這項研究為阿片類藥物引入了一種新的概念。當(dāng)前的阿片類藥物是強效的止痛藥，但很快導(dǎo)致成癮。因此，迫切需要新型非成癮性阿片類藥物。
想象一下，大腦中的蛋白是一家公司，磷酸化蛋白質(zhì)組學(xué)允許這些研究人員一次性關(guān)注所有員工的活動，而不是專注于少數(shù)幾個人。質(zhì)譜法可成為一種研究大腦或其他器官中藥物靶點的有力工具。Mann說：“在美國，當(dāng)前與阿片類藥物有關(guān)的死亡流行病是一個令人震驚的例子，它表明處方藥具有成癮性等強烈副作用的潛在后果。通過質(zhì)譜法，我們能夠在全局水平上了解藥物的影響，并簡化副作用較小的新藥開發(fā)。”Mann解釋道，新藥的設(shè)計僅是磷蛋白質(zhì)組學(xué)的許多潛在應(yīng)用之一，并預(yù)測這種方法也可用于產(chǎn)生關(guān)于細胞如何使用它們的指揮鏈來處理信息以及藥物對其他器官中的影響的知識。
天普大學(xué)路易斯卡茨醫(yī)學(xué)院的Lee-Yuan Liu-Chen博士及其團隊使用兩種藥物進行了行為實驗，發(fā)現(xiàn)它們具有相似的鎮(zhèn)痛效果，但它們的副作用水平差異很大。這些研究人員分析了經(jīng)過兩種藥物處理的動物大腦種的磷酸化蛋白質(zhì)組差異，發(fā)現(xiàn)這些差異來源于少數(shù)信號通路。抑制其中的一種信號通路能夠極大地減少一些副作用。


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