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上海邦景實(shí)業(yè)有限公司
主營產(chǎn)品： 進(jìn)口elisa試劑盒，細(xì)胞株，細(xì)胞系，菌種 |
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公司信息
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- 地址：
- 上海市閔行區(qū)碧泉路36弄銀宵大廈
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- 200000
- 網(wǎng)址：
- www.bhsy-e.com/
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- 型號
- 品牌 其他品牌
- 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷商
- 所在地 上海市
更新時(shí)間：2023-09-19 09:41:49瀏覽次數(shù)：174
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商品屬性：
產(chǎn)品名稱：大鼠氣管軟骨細(xì)胞
貨號：BJ-X97719
規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
分類：原代細(xì)胞
商品介紹：
名稱 大鼠氣管軟骨細(xì)胞 3生長特性 貼壁 細(xì)胞形態(tài) 梭形、多角形 方法簡介 公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠氣管軟骨細(xì)胞采用中性-膠原酶聯(lián)合消化法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。 推薦傳代次數(shù) 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳 推薦換液頻率 每3-4天換液一次 |
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細(xì)胞處理：產(chǎn)品僅用于科研
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
點(diǎn)頭根霉 蕁麻青霉
鼠傷 假單胞桿菌
雙孢蘑菇(白蘑菇、洋蘑菇) 冰核細(xì)菌
威爾酵母 長根菇(長根奧德磨)
葉柄粘球菌 皂味口磨
大鼠WAP四二硫化物核心域蛋白1(WFDC1)elisa檢測試劑盒
大鼠V-Rel網(wǎng)狀內(nèi)皮增生病毒癌基因同源物A(RELA)elisa檢測試劑盒
大鼠V-Myc骨髓細(xì)胞瘤病毒癌基因同源物(MYC)elisa檢測試劑盒
大鼠V-Jun肉瘤病毒癌基因同源物(JUN)elisa檢測試劑盒
大鼠V-Fos-FBJ骨肉瘤病毒癌基因同源物(FOS)elisa檢測試劑盒
大鼠氣管軟骨細(xì)胞大鼠胰α2A(AMY2A)elisa檢測試劑盒免費(fèi)代測
大鼠胰淀素(Amylin)elisa檢測試劑盒
大鼠胰淀素(IAPP)elisa檢測試劑盒
大鼠胰多肽 elisa檢測試劑盒
大鼠胰高血糖素(GC)elisa檢測試劑盒
操作要點(diǎn)：
1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
