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上海邦景實業(yè)有限公司
主營產(chǎn)品： 進(jìn)口elisa試劑盒，細(xì)胞株，細(xì)胞系，菌種 |
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- www.bhsy-e.com/
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- 品牌 其他品牌
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- 所在地 上海市
更新時間：2023-05-25 09:32:39瀏覽次數(shù)：253
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商品屬性：
產(chǎn)品名稱：人胰腺癌細(xì)胞：MIA PaCa-2
貨號：BJ-X96933
規(guī)格：1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
分類：細(xì)胞系
商品介紹：
名稱 MIA PaCa-2 (人胰腺癌細(xì)胞) 種屬 人類 年齡（性別） 男性，65歲 組織來源 未知 生長特性 半貼半懸 細(xì)胞形態(tài) 上皮樣貼壁細(xì)胞，伴有圓形漂浮細(xì)胞 背景描述 The MIA PaCa-2 cell line was established by A. Yunis, et al. in 1975 from tumor tissue of the pancreas obtained from a 65-year-old Caucasian male. 生物安全等級 1 生長培養(yǎng)基 DMEM＋10%FBS＋2.5%HS＋1%P/S 推薦傳代比例 1:3-1:8 推薦換液頻率 2~3次/周 倍增時間 ~26小時 (PubMed=25984343); 25.7±4.3小時 (PubMed=27067801); ~40小時 (ATCC); ~30-40小時 (DSMZ) 凍存條件 凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO 溫度：液氮 培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5% 溫度：37℃ 基因表達(dá)情況 human colony stimulating factor, subclass I (CSF-I); plasminogen activator 保藏機(jī)構(gòu) ATCC; CRL-1420 DSMZ; ACC-733 ECACC; 85062806 JCRB; JCRB0070 |
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細(xì)胞處理：產(chǎn)品僅用于科研
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
Nutlin-3(MDM2 拮抗劑 )1mg Actin-Tracker Green( 微絲綠色熒光探針 )0.2mL
Okadaic acid 鉀鹽 (PP1 和 PP2A 抑制劑 )10μg Actinomycin D( 基因轉(zhuǎn)錄抑制劑 )1mg
Paclitaxel(TAXOL)( )100μL Acridine Orange(AO)100mg
PD 98059(MAPKK 抑制劑 )2mg Ac-LEHD-FMK(Caspase9Inhibitor)20μL
PDTC(NF-κB 抑制劑 / 抗氧化劑 )1g Ac-IETD-FMK(Caspase8Inhibitor)20μL
FITC標(biāo)記的極光激酶A相互作用蛋白1抗體
FITC標(biāo)記的基質(zhì)金屬-2抗體
FITC標(biāo)記的軸抑制蛋白2抗體
FITC標(biāo)記的乙醛脫氫酶1蛋白家族L1抗體
FITC標(biāo)記的Rho GTP酶激活蛋白20抗體
人胰腺癌細(xì)胞：MIA PaCa-2大鼠催產(chǎn)素(OT)elisa檢測試劑盒
大鼠催產(chǎn)素(OT)elisa檢測試劑盒免費代測
大鼠催產(chǎn)素受體(OXTR)elisa檢測試劑盒
大鼠催乳素 PRL elisa檢測試劑盒
大鼠催乳素(PRL)elisa分析檢測試劑盒
操作要點：
1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi)，補加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實驗。
