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上海邦景實(shí)業(yè)有限公司
主營產(chǎn)品: 進(jìn)口elisa試劑盒,細(xì)胞株,細(xì)胞系,菌種 |
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更新時(shí)間:2022-11-15 09:34:25瀏覽次數(shù):163
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扁柄側(cè)耳 刺孢吸水鏈霉菌北京變種
皮狀絲孢酵母 嗜水氣單胞菌
膜醭畢赤酵母
0.1%蛋白胨水溶液100ml 杰丁漢遜酵母
金龜子綠僵菌小孢變種 貝雷絲孢酵母
商品屬性:
產(chǎn)品名稱:人膽管細(xì)胞型肝癌細(xì)胞:HCCC-9810
貨號(hào):BJ-X96414
規(guī)格:1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
分類:細(xì)胞系
商品介紹:
名稱 HCCC-9810 (人膽管細(xì)胞型肝癌細(xì)胞) 種屬 人類 年齡(性別) 女性 組織來源 肝膽管細(xì)胞癌 生長特性 貼壁細(xì)胞 細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣 背景描述 HCCC-9810細(xì)胞源自一位女性肝膽管細(xì)胞癌患者,呈上皮細(xì)胞樣。HCCC-9810細(xì)胞染色體模式數(shù)為71,但其染色體數(shù)目可以在22-117的范圍內(nèi)變動(dòng)。HCCC-9810細(xì)胞倍增時(shí)間為20.4小時(shí);細(xì)胞內(nèi)AFP、CEA和CA19-9的分泌水平低,HCCC-9810細(xì)胞在裸鼠中的成瘤率為20%。 生長培養(yǎng)基 RPMI-1640+10% FBS+1% P/S 推薦傳代比例 1:2-1:4 推薦換液頻率 2~3次/周 凍存條件 凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO 溫度:液氮 培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5% 溫度:37℃ 致瘤性 Yes, in nude mice. |
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:產(chǎn)品僅用于科研
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
操作要點(diǎn):
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動(dòng)凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過最易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。
5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
細(xì)胞凋亡關(guān)聯(lián)激酶
水通道蛋白-2
腺苷三酸結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體A1
三酸腺苷結(jié)合盒亞家族G1
β分泌酶
人膽管細(xì)胞型肝癌細(xì)胞:HCCC-9810基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1α(SDF-1α)elisa檢測試劑盒
大鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)elisa分析檢測試劑盒
大鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)elisa檢測試劑盒
大鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)elisa檢測試劑盒免費(fèi)代測
大鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生因子2(SDF2)elisa檢測試劑盒