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膽酸(CA)檢測試劑盒測定

2020-1-6  閱讀(207)

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【詳細說明】

膽酸(CA)檢測試劑盒抗原修復方法 
常用抗原修復液:檸檬酸緩沖液(0.01M pH6.0)、EDTA 抗原修復液(pH8.0 或
9.0)等等。 
一、酶消化修復法 
切片脫蠟水化處理,TBS 沖洗,在組織上滴加或,37℃孵育
20~30min 后 TBS 沖洗即可。 
二、微波抗原修復法 
微波盒中加入抗原修復液微波加熱至沸騰,將脫蠟水化后的切片置于耐高溫塑料
切片架上,放入已沸騰的緩沖液中,中檔繼續(xù)微波 10~15min,取出微波
盒冷卻至室溫后,自來水沖洗,取出切片。因不同微波爐微波處理時間存在差異,
須自行調(diào)整。 
三、直接高壓抗原修復法 
取修復液于不銹鋼高壓鍋中加熱至沸騰,將組織切片置于耐高溫切片架上,修復
液沸騰后放入切片架,蓋上鍋蓋,待噴氣后計時 1.5~2.5min 即可脫離熱源,自
然冷卻至室溫后自來水沖洗,取出切片。此方法適用于較難檢測或核抗原的修復。
四、隔水式高壓抗原修復法 
不銹鋼高壓鍋中加自來水加熱至沸騰,微波盒中加入修復液于微波爐中加熱至沸
騰,將切片放入微波盒中,再將微波盒放入高壓鍋中蓋上鍋蓋,待噴氣后計時
4~8 min 即可關閉熱源,自然冷卻至室溫后自來水沖洗,取出切片。此方法適用
于較難檢測或核抗原的修復。 
2.加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。   
4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。 
7.溫育:操作同3。
8.洗滌:操作同5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10分鐘.
10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。
11.膽酸(CA)檢測試劑盒測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。



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