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上海邦景實業(yè)有限公司
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抗原的要求與抗原效價的測定
2025-3-31 閱讀(46)
1、抗原的要求：
用于ELISA的抗原必須采用相當純的抗原，如果含有其它雜質，將與抗原共同競爭固相載體上的有限位置。用于其它血清學反應的抗原不一定能適用ELISA實驗，必須經過試驗，抗原必須能牢固地吸附于載體上，而不喪失其免疫活性，且可得到有規(guī)律的重復的結果。另外在吸附載體后，對加入的各種試劑產生最小的非特異性吸附，即與陰、陽性血清結合差異較大。
2、抗原效價的測定
可采用單方陣或雙方陣試驗。①單方陣試驗：以不同稀釋度的抗原包被酶標板，以常規(guī)的1﹕200倍稀釋的陽性血清加入，再加入酶標抗體、顯色、測OD值，以OD值為1.0時，相應的抗原濃度作為使用效價；②雙方陣試驗比較精確，它既能測出抗原的最適濃度又能測出抗體的最適濃度。即將抗原抗體均稀釋成不同濃度進行酶標抗體反應，以血清稀釋倍數最高的陰、陽性血清的光吸收值差最大的所對應的抗原稀釋度為抗原的使用效價。
已吸附的抗原的固相載體經凍干或干燥保存很穩(wěn)定,數月仍不失活。
