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上海邦景實業(yè)有限公司
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抗原的要求與抗原效價的測定
2025-3-31 閱讀(18)
1、抗原的要求：
用于ELISA的抗原必須采用相當純的抗原，如果含有其它雜質(zhì)，將與抗原共同競爭固相載體上的有限位置。用于其它血清學(xué)反應(yīng)的抗原不一定能適用ELISA實驗，必須經(jīng)過試驗，抗原必須能牢固地吸附于載體上，而不喪失其免疫活性，且可得到有規(guī)律的重復(fù)的結(jié)果。另外在吸附載體后，對加入的各種試劑產(chǎn)生最小的非特異性吸附，即與陰、陽性血清結(jié)合差異較大。
2、抗原效價的測定
可采用單方陣或雙方陣試驗。①單方陣試驗：以不同稀釋度的抗原包被酶標板，以常規(guī)的1﹕200倍稀釋的陽性血清加入，再加入酶標抗體、顯色、測OD值，以O(shè)D值為1.0時，相應(yīng)的抗原濃度作為使用效價；②雙方陣試驗比較精確，它既能測出抗原的最適濃度又能測出抗體的最適濃度。即將抗原抗體均稀釋成不同濃度進行酶標抗體反應(yīng)，以血清稀釋倍數(shù)最高的陰、陽性血清的光吸收值差最大的所對應(yīng)的抗原稀釋度為抗原的使用效價。
已吸附的抗原的固相載體經(jīng)凍干或干燥保存很穩(wěn)定,數(shù)月仍不失活。
