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武漢泰特沃斯科技有限公司
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更新時間：2022-10-29 09:57:18瀏覽次數(shù)：666次
聯(lián)系我時，請告知來自 環(huán)保在線武漢泰特沃斯科技有限公司，是國內(nèi)*的氣相色譜儀供應商。GC2030系列氣相色譜儀是武漢泰特沃斯科技有限公司潛心研究研發(fā)出來的氣相色譜儀。以下由武漢泰特沃斯科技有限公司色譜技術人員主要介紹用氣相色譜內(nèi)標法測定植物油中角鯊烯含量。
武漢泰特沃斯科技有限公司，是國內(nèi)*的氣相色譜儀供應商。GC2030系列氣相色譜儀是武漢泰特沃斯科技有限公司潛心研究研發(fā)出來的氣相色譜儀。以下由武漢泰特沃斯科技有限公司色譜技術人員主要介紹用氣相色譜內(nèi)標法測定植物油中角鯊烯含量。
角鯊烯是一種高不飽和的天然萜類化合物，屬于脂質(zhì)不皂化物，它初是從鯊魚的肝油中發(fā)現(xiàn)的，1914年被命名為Squalene，其化學名為(6E,10E,14E,18E)-2,6,10,15,19,23-六甲基-2,6,10,14,18,22-二十四碳六烯。它屬于開鏈三萜，又稱*萜，也稱鯊烯，具有提高體內(nèi)超氧化物歧化酶(SOD)活性、增強機體免疫能力、防癌、防心血管疾病、抗衰老、抗疲勞、抗腫瘤等多種生理功能。因此，被廣泛應用于醫(yī)藥和化妝品等相關領域。
目前，AOAC(Revised 1996)標準中有測定角鯊烯含量的方法，此方法通過不皂化物提取，柱色譜分離，后采用滴定方法對角鯊烯進行定量，檢測過程較為繁瑣，且后采用滴定法測量，誤差較大。文獻報道植物油中角鯊烯含量測定的方法較多，主要有高效液相色譜法、氣相色譜法、氣質(zhì)聯(lián)用法等。從采用的定量方式來看，利用高效液相色譜和氣相色譜法多采用外標法定量，很少用到內(nèi)標法，而氣質(zhì)聯(lián)用法在定量方式主要采用內(nèi)標法定量。從采用的前理處理方法來看，主要有溶劑稀釋法、SPE柱法和皂化法。溶劑稀釋法直接進樣，不僅會污染色譜柱，縮短色譜柱使用壽命，而且雜質(zhì)峰較多，影響與目標峰的分離；SPE柱法雖說能去除大部分油脂雜質(zhì)，但是仍有部分雜質(zhì)會殘留，殘留下來的雜質(zhì)出峰時間較長，且使用SPE進行前處理油脂樣品上樣量小，對于角鯊烯含量較低的樣品不適用，從目前的文獻報道中看，也僅有角鯊烯含量較高的橄欖油用SPE進行前處理，該法前處理檢測成本較高不適合推廣使用；由于角鯊烯屬于脂質(zhì)不皂化物，因此本研究在文獻基礎上選擇不皂物提取經(jīng)典的方法——液液萃取法作為前處理方法。但不皂化物提取操作比較繁瑣，難免會有所損失，而內(nèi)標定量方法會減少操作上的誤差，提高方法的準確性。因此，本研究通過內(nèi)標種類和用量的選擇，選出一種適用于氣相色譜法定量角鯊烯的內(nèi)標物質(zhì)角鯊烷，建立一種以角鯊烷為內(nèi)標測定植物油中的角鯊烯含量的氣相色譜法，該法不僅分離效果好、靈敏度高、回收率高且成本低，適合植物油中角鯊烯含量測定方法推廣使用。
標準品的配制
準確稱取25 mg角鯊烯、25 mg角鯊烷標準品分別用正己烷定容于25 mL容量瓶，即配制成1 mg/mL角鯊烯標準儲備液和1 mg/mL內(nèi)標角鯊烷標準溶液。
色譜條件
氣相色譜柱：HP-5毛細管柱，長30 m，內(nèi)徑0.32 mm，薄膜厚度0.25 μm；載氣：高純氮氣(純度99.999% )，恒壓：16 psi，分流比1∶10；進樣口溫度：250 ℃；柱溫采用程序升溫方式，以15 ℃/min的速率從160 ℃升溫到220℃，保持2 min，然后以5 ℃/min的速率升溫到280 ℃，保持20 min；后以5 ℃/min的速率升溫到300 ℃，保持2 min；FID檢測器：溫度300 ℃，氫氣流速40 mL/min，空氣流速450 mL/min，尾吹氣流速30 mL/min；進樣量：1.0 μL。
內(nèi)標物質(zhì)的選擇
采用內(nèi)標法定量時，內(nèi)標物的選擇是一項十分重要的工作。內(nèi)標物選擇的原則為內(nèi)標物應當是試樣中不存在的純物質(zhì)，這樣內(nèi)標物能準確加到樣品中去；內(nèi)標物應當和被分析的樣品組分有基本相同或盡可能*的物理化學性質(zhì)(如化學結構、極性、揮發(fā)度及在溶劑中的溶解度等)、色譜行為和響應特征，與被分析物質(zhì)為同系物；同時，在色譜分析條件下，內(nèi)標物必須能與樣品中各組分充分分離。根據(jù)以上特點，本研究從二十四烷、角鯊烷、5α-膽甾烷、正三十二烷中篩選作為植物油中角鯊烯含量測定的內(nèi)標，按1.2.3色譜條件進行分析，這幾種內(nèi)標出峰時間分別為二十四烷9.4 min，角鯊烷12.9 min，5α-膽甾烷 19.4 min，三十二烷 20.6 min。通過8種植物油(花生油、油茶籽油、葵花籽油、米糠油、芝麻油、玉米油、特級初榨橄欖油、大豆油)進行測定，只有角鯊烷能與樣品中各組分*分離，且各植物油本底不含內(nèi)標角鯊烷，同時，角鯊烷與角鯊烯結構相似，出峰位置較為接近且可*分離，滿足方法學中對內(nèi)標的要求，因此，選用角鯊烷作為角鯊烯氣相色譜法測定的內(nèi)標物質(zhì)。
目前，利用液液萃取法提取植物油中角鯊烯的方法主要利用外標法定量，但是由于液液萃取前處理方法操作較為繁瑣，難免會有所損失。本研究通過8種植物油(花生油、油茶籽油、葵花籽油、米糠油、芝麻油、玉米油、特級初榨橄欖油、大豆油)，4種內(nèi)標物質(zhì)(二十四烷、角鯊烷、5α-膽甾烷、正三十二烷)進行篩選，選出一種適合氣相色譜法定量植物油中角鯊烯的內(nèi)標物質(zhì)角鯊烷，只有角鯊烷能與樣品中各組分*分離，且各植物油本底不含內(nèi)標角鯊烷，同時，對角鯊烷內(nèi)標加入量進行選擇，建立一種以角鯊烷為內(nèi)標定量角鯊烯的氣相色譜法，該方法加標回收率為95.5%～103.0%，精密度為1.42%～5.89%，檢出限為0.05 mg/kg，由此可以看出，該方法不僅回收率高，重現(xiàn)性好，而且靈敏度高，該方法的建立不僅為植物油中角鯊烯的測定提供檢測參考，同時為下一步科學評價植物油營養(yǎng)成分提供技術支撐。
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