HiPuri Beads全血基因組DNA提取磁珠試劑盒
產(chǎn)品名稱 | 貨號(hào) | 規(guī)格 | 保存 | 價(jià)格 |
HiPuri Beads全血基因組DNA提取磁珠試劑盒 | E1010L2100 | 10 T | 4℃ | 550 |
產(chǎn)品介紹
HiPuri Beads全血基因組DNA提取磁珠試劑盒適用于從抗凝處理的全血樣品中快速、高效地提取基因組DNA。提取過(guò)程采用超順磁性微球，無(wú)需離心操作；使用預(yù)制的緩沖液，可直接進(jìn)行提取，無(wú)需預(yù)先去除紅細(xì)胞。
本產(chǎn)品既可以手動(dòng)進(jìn)行少量樣品的提取，也適合于用自動(dòng)化工作站進(jìn)行高通量操作。提取的產(chǎn)物可用于酶切，PCR擴(kuò)增、檢測(cè)等后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 | HiPuri Beads全血基因組DNA提取磁珠試劑盒 |
HiPuri Beads™ ① | 保存于2~8℃，避免冷凍。 |
Lysis Buffer ② | 15~25℃密閉儲(chǔ)存。 |
Binding Buffer ③ | 15~25℃密閉儲(chǔ)存。*使用前請(qǐng)加入異丙醇。 |
Washing Buffer I ④ | 15~25℃密閉儲(chǔ)存。*使用前請(qǐng)加入無(wú)水乙醇。 |
Washing BufferⅡ ⑤ | 15~25℃密閉儲(chǔ)存。*使用前請(qǐng)加入無(wú)水乙醇。 |
Elution Buffer ⑥ | 15~25℃密閉儲(chǔ)存。 |
Proteinase K Solution ⑦ | 15~25℃下可保存1年，2~8℃下可*保存。 |
異丙醇 | 分析純，需用戶自備。 |
無(wú)水乙醇 | 分析純，需用戶自備。 |
磁性分離器 | 需用戶自備，可從李記生物公司購(gòu)買。 |
保質(zhì)期 | 2年 |
操作流程
*使用前：
1、在Binding Buffer（③）中加入量（見(jiàn)瓶身標(biāo)簽）的異丙醇（分析純），并于“口”內(nèi)打上“√”，混勻后室溫下密閉保存。
2、在Washing Buffer I （④）中加入量（見(jiàn)瓶身標(biāo)簽）的無(wú)水乙醇（分析純），并于“口”內(nèi)打上“√”，混勻后室溫下密閉保存。
3、在Washing BufferⅡ（⑤）中加入量(見(jiàn)瓶身標(biāo)簽)的無(wú)水乙醇（分析純），并于“口”內(nèi)打上“√”，混勻后室溫下密閉保存。
準(zhǔn)備工作
1、1.5mL離心管：2個(gè)/樣品
2、單通道移液器:20μL、200μL、1000μL
3、漩渦振蕩器
4、垂直混合儀
5、恒溫水浴鍋/金屬?。?5℃
操作步驟：
1、裂解
取一個(gè)新的1.5mL離心管，加入200μL的抗凝血液樣品（不足200μL時(shí)可用PBS或Elution Buffer（⑥）補(bǔ)足），再分別加入10μL的Proteinase K Solution （⑦）和230μL的Lysis Buffer （②）,以渦旋振蕩器zui大轉(zhuǎn)速漩渦震蕩10s后，置于55℃條件下反應(yīng)5min。
2、結(jié)合
加入320μL的在Binding Buffer（③）(檢查是否已加入異丙醇）和20μL的HiPuri Beads（①），以渦旋振蕩器zui大轉(zhuǎn)速漩渦震蕩10min（或漩渦震蕩10s后置于垂直混合儀上反應(yīng)10min）。然后將離心管置于磁性分離器上放置2min，用移液器去上清液并取下離心管。
注：此步驟的磁性分離時(shí)間應(yīng)不少于2min。
3、洗滌
（1）加入600μL Washing Buffer I （④）（檢查是否已加入無(wú)水乙醇），漩渦震蕩1min或用移液器緩慢吹打磁珠20次，使磁珠20次，使磁珠充分重懸，再將離心管置于磁性分離器上直至溶液澄清，用移液器去上滑液并取下離心管。重復(fù)該步驟一次。
（2）加入600μL Washing BufferⅡ（⑤）（檢查是否已加入無(wú)水乙醇），漩渦震蕩1min或用移液器緩慢吹打磁珠20次，使磁珠充分重懸，再于室溫下靜置1min后，將離心管置于磁性分離器上直至溶液澄清，用移液器移去上清液。
注：步驟（2）應(yīng)盡量除盡洗滌液。
4、干燥
保持離心管于磁性分離器上，于室溫下靜置10min后，取下離心管。
5、洗脫
加入100~200μL Elution Buffer （⑥），用移液器緩慢吹打磁珠50次，使磁珠充分重懸。然后于55℃條件下加熱5min，將離心管置于磁性分離器上直至溶液澄清，轉(zhuǎn)移上清液至新的離心管中，此即為純化得到的基因組DNA，可保存于-20℃。
注意事項(xiàng)
1、操作之前，請(qǐng)務(wù)必認(rèn)真閱讀本產(chǎn)品手冊(cè)。
2、血液樣品的質(zhì)量對(duì)產(chǎn)物DNA的純化量有較大影響，應(yīng)避免反復(fù)凍融血液樣品。
3、應(yīng)避免對(duì)磁珠進(jìn)行冷凍、離心等操作。
4、磁珠取用前應(yīng)充分重懸均勻。
5、磁珠干燥前，應(yīng)使用移液器吸盡洗滌液。
6、應(yīng)避免磁珠過(guò)度干燥，否則會(huì)嚴(yán)重降低核酸洗脫效率。
7、建議使用質(zhì)量好的離心管和移液器吸頭，避免因粘附磁珠而造成損失。
8、在96孔板中進(jìn)行磁性分離操作時(shí)，磁珠吸附時(shí)間可適當(dāng)延長(zhǎng)至4-5min。
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