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上海李記生物科技有限公司


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Quick Cell 外泌體提取試劑盒

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具體成交價以合同協(xié)議為準

產(chǎn)品型號D3030L1411

品       牌

廠商性質(zhì)生產(chǎn)商

所  在  地上海市

聯(lián)系方式:蘇女士查看聯(lián)系方式

更新時間:2017-10-13 09:55:06瀏覽次數(shù):659次

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產(chǎn)品簡介

Quick Cell 外泌體提取試劑盒是由細胞分泌的包含RNA和蛋白質(zhì)的小囊泡(20-200 nm),在血液、唾液、尿液及乳汁等體液中大量存在。外泌體被認為具有細胞間信使的功能,在特定細胞之間傳遞它們的效應物或信號分子;然而其構(gòu)造、效應物組成以及所參與的生物學通路目前尚不明晰。

詳細介紹

Quick Cell 外泌體提取試劑盒產(chǎn)品描述
   外泌體是由細胞分泌的包含RNA和蛋白質(zhì)的小囊泡(20-200 nm),在血液、唾液、尿液及乳汁等體液中大量存在。外泌體被認為具有細胞間信使的功能,在特定細胞之間傳遞它們的效應物或信號分子;然而其構(gòu)造、效應物組成以及所參與的生物學通路目前尚不明晰。
 外泌體的生物學功能研究中需要分離完整的外泌體顆粒,而傳統(tǒng)超速離心方法步驟繁瑣、硬件要求高、操作難度大。李記生物自主開發(fā)的外泌體快速提取試劑盒,組分經(jīng)過優(yōu)化處理,適用于細胞培養(yǎng)上清液、血清、血漿、尿液及其他體液(腦脊液、腹水、羊水、乳汁以及唾液等)中的外泌體提取,并搭配純化過濾裝置,可快速高效地獲得高純度外泌體顆粒。
本試劑盒處理單位樣品成本僅為國外同類產(chǎn)品的1/6-1/3,經(jīng)上海市計量測試技術(shù)研究院檢測,本試劑盒與國外產(chǎn)品提取純化相同樣品所得的外泌體,沒有顯著差異。
試劑盒組成

組分名稱

貨號

規(guī)格

Exosomoe Concentration Solution

D3030L1411-1

100 mL

Exosomoe Purification Filter

D3030L1411-2

20 tubes2mL

       *RNase/DNase Free, Sterile

Quick Cell 外泌體提取試劑盒運輸與保存條件

常溫運輸,室溫條件下質(zhì)保期24個月,使用前充分混勻。

使用方法

1.條件準備 

高速離心機(可達10000g離心力);2mL、50mL(15mL)離心轉(zhuǎn)子;1.5mL,50mL(15mL)離心管 1×PBS緩沖液。

2.樣品預處理

樣品準備:如果是凍存樣品,從冰箱取出后于25℃水浴中進行解凍,將*融化后的樣品置于冰上;如果是新鮮樣品,收集樣品后置于冰上;

離心去除細胞碎片,將樣品轉(zhuǎn)移至離心管中,在4℃,3000 g條件下離心10 min,取上清轉(zhuǎn)移到新離心管中。

離心去除其他雜質(zhì),*次離心收集的上清液,在4℃,10000 g條件下離心20 min,取離心上清液轉(zhuǎn)移到新的離心管中備用。

注:本試劑盒盒可處理多種樣品,處理量因樣品種類不同而有差異。單次提取可處理的不同樣品量范圍見下表。

表1.單次提取可以處理的不同樣品量的范圍(單位:mL)

樣品名稱

細胞上清

血清

血漿

尿液

腦脊液

腹水

羊水

乳液

唾液

樣 品 量

120

0.510

0.510

120

120

120

120

120

0.510

3.提取外泌體

上清液預處理:在去除雜質(zhì)的離心上清液中加入Exosomoe Concentration Solution(ECS試劑);部分粘稠的樣品(血清、血漿、乳液、唾液等)需先加入預冷的與樣品等體積的1×PBS進行稀釋,之后再加入ECS試劑,試劑用量如下表,表中樣品為舉例值,其他劑量樣品根據(jù)表中的試劑用量等比例調(diào)整。

表2.外泌體提取試劑用量表(單位:mL)

樣品名稱

細胞上清

血清

血漿

尿液

腦脊液

腹水

羊水

乳液

唾液

樣品劑量

20

10

10

20

20

20

20

10

10

1 x PBS

20

10

10

/

/

/

/

10

10

ECS

5

5

5

5

5

5

5

5

5

溶液混合:加入ECS試劑后將離心管蓋緊,上下顛倒離心管10-20次,再放置于2℃至8℃靜置過夜(10 h-12 h);

沉淀外泌體:取出裝有混合液的離心管于4℃以10000 g離心60 min,棄上清,沉淀中富含外泌體顆粒;(注:盡可能吸凈上清液)

外泌體重懸:取400μL 1×PBS均勻吹打離心沉淀物,待其均勻懸浮在PBS中后,將重懸液轉(zhuǎn)移至新的1.5 mL離心管中;

收獲外泌體顆粒:將含有重懸液的1.5mL離心管于4℃以12000 g離心2 min,保留上清液,該上清液中富含外泌體顆粒。

4.純化外泌體

純化外泌體:將收獲的外泌體顆粒粗品轉(zhuǎn)入Exosomoe Purification Filter(EPF柱)上室中,于4℃以3000 g離心10 min,離心后收集EPF柱管底的液體,此液體即為純化后的外泌體顆粒;

外泌體的保存:純化后的外泌體以50 -100μL進行分裝,分裝后的外泌體保存于-80℃低溫冰箱中,以備后繼實驗使用。

關(guān)鍵詞:高速離心機

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