微生物實驗室常見消毒滅菌方法
殺菌消毒是保障微生物實驗室環(huán)境的重要環(huán)節(jié)。實驗室使用的設備必須經過嚴苛的滅消毒菌處置,常見的器材通常有玻璃器材、合金裝置、橡膠制品和塑料制品等,每一類器材的殺菌消毒措施都有不同的方式。
什么是殺菌與消毒?
消毒是指殺滅或清除傳播媒介上的病原微生物,達到無害化處理。根據有無已知的傳染源可分成預防消毒和疫原性消毒。
滅菌便是或去除傳播媒介上的所有微生物(包含芽孢),使其達到無菌。經過殺菌的物品稱作“無菌物品”。
消毒和滅菌是兩種不同的方法。滅菌可包含消毒,但滅菌不能取代消毒。消毒通常用在實驗室的檢測環(huán)境、人員手部等,滅菌常用作檢測工具、檢測試劑等。
常見的消毒滅菌方式,目前常見的消毒滅菌方式多為物理法和化學法。
一、物理方法
干熱滅菌法之干熱空氣滅菌法:
干熱空氣滅菌法是通過恒溫干燥箱進行高溫滅菌,由于熱穿透力較差,細菌耐熱性強,必須進行長時間段受高溫作用才能達滅菌的目的。所以干熱空氣滅菌的采用的溫度通常高于濕熱滅菌法。為了確保滅菌效果,通常規(guī)定:135-140°C滅菌3-5h;160-170°C滅菌2-4h。180-200°C滅菌0.5-1h,殺死細菌和芽孢,從而達到滅菌目的的一種方法。
主要用于不便于在壓力蒸氣滅菌器中滅菌,且不易被高溫損壞的玻璃器皿、金屬器械以及不能和蒸汽接觸的物品的滅菌
干熱滅菌法之火焰燒灼:
火焰燒灼的原理是:將要滅菌的物品在火焰之中燃燒,使所有微生物碳化,方法簡單滅菌*,對物品毀壞大。
適用于:無價值的物品的滅菌、不怕火燒的實驗品器具,如接種杯、刀片、鑷子、容器等物品的滅菌。
濕熱滅菌法:
壓力蒸氣濕熱滅菌是最常見的滅菌方式。它通過高壓蒸氣以及在蒸氣環(huán)境中存在的潛熱作用和良好的殺傷力,使菌體蛋白凝固變性,然后死亡。
這個方法適用于布類工作服、各種器皿、合金設備、橡膠塞、蒸餾水、棉塞、紙及某些培養(yǎng)液的滅菌。
紫外線滅菌:
用紫外線燈照射滅菌方式。紫外線是一種低熱量的電磁輻射,可消滅多種細菌。紫外線的殺菌原理有兩方面,一是直接作用,即破壞細菌、病毒的DNA等遺傳物質,改變細胞的遺傳轉錄特性,使生物體喪失蛋白質的合成和復制繁殖能力。二是間接作用,即一定波長的紫外線(通常采用UVA波段)照射納米TiO2等光催化劑(光觸媒),發(fā)生類似光合作用的光催化反應,產生出氧化能力的自由氫氧基和活性氧,具有很強的光氧化還原功能,可氧化分解各種有機化合物和部分無機物,能破壞細菌的細胞膜和固化病毒的蛋白質,可殺滅細菌和分解有機污染物,把有機污染物分解成無污染的水(H2O)和二氧化碳(CO2),因而具有的殺菌、除臭、防霉、防污自潔、凈化空氣功能。
局限于超凈工作臺、微生物柜及整個實驗室的殺菌。
過濾除菌法:
利用細菌不能通過致密具孔濾材的原理以除去液體或氣體中微生物的方式。常用作熱不穩(wěn)定的原料或藥品溶液的除菌。
適用于遇熱易發(fā)生分解、變性而失效的試劑、酶液、血清、培養(yǎng)液等
二、化學方法
化學消毒劑消毒法:
常用的化學消毒劑包括甲醛、、70%-75%乙醇、過氧乙酸、過氧化氫、0.1%新潔爾滅、環(huán)氧乙烷、碘伏等。
適用于那些不能利用物理方法進行滅菌的物品、空氣、工作面、操作者皮膚、某些實驗器皿等。