PCR實驗室凈化系統(tǒng)設(shè)計要求有哪些

??PCR實驗室又叫基因擴(kuò)增實驗室。PCR是聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(Polymerase Chain Reaction)的簡稱。是一種分子生物學(xué)技術(shù)，用于放大特定的DNA片段，可看作生物體外的特殊DNA復(fù)制。通過DNA基因追蹤系統(tǒng)，能迅速掌握患者體內(nèi)的病毒含量，其精確度高達(dá)納米級別。

當(dāng)前，PCR實驗室廣泛應(yīng)用于醫(yī)院及各疾病預(yù)防控制中心的疫病檢驗，2010年，衛(wèi)生部辦公廳制定并發(fā)布了《醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床基因擴(kuò)增檢驗實驗室管理辦法》以及《醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床基因擴(kuò)增檢驗實驗室工作導(dǎo)則》（以下簡稱導(dǎo)則）。導(dǎo)則規(guī)定了PCR實驗室設(shè)計的基本原則，原則上PCR實驗室需設(shè)置4個區(qū)域∶試劑儲存和準(zhǔn)備區(qū)、標(biāo)本制備區(qū)、擴(kuò)增區(qū)、產(chǎn)物分析區(qū)，各個分區(qū)具體設(shè)備配置也各有不同。

試劑儲存和準(zhǔn)備區(qū)：冷凍冷藏冰箱、超凈工作臺、臺式離心機(jī)、掌上離心機(jī)、微孔板離心機(jī)、可移動紫外燈、混勻器、田平、微量加樣器等；

標(biāo)本制備區(qū)：2～8℃冰箱、低溫冰箱或超低溫冰箱、生物柜、高速離心機(jī)、均質(zhì)儀、核酸提取儀、蒸汽滅菌器、超微量紫外分光光度計、過氧化氫消毒劑、金屬浴、水浴箱等；

?擴(kuò)增區(qū)：普通PCR儀、熒光定量PCR儀、數(shù)字PCR儀、質(zhì)譜儀、微量加樣器、低溫冰箱、可移動紫外燈等；

?產(chǎn)物分析區(qū)：凝膠成像系統(tǒng)、電泳系統(tǒng)、微量加樣器、可移動紫外燈等。

根據(jù)導(dǎo)則要求，PCR 實驗室各個區(qū)域無論在空間上還是使用中必須*獨立，不能有任何空氣的直接相通。空氣流向可按照：試劑儲存和準(zhǔn)備區(qū)——標(biāo)本制備區(qū)——擴(kuò)增區(qū)——產(chǎn)物分析區(qū)壓力遞減的方式進(jìn)行，防止各區(qū)域空氣的交叉污染。

PCR 反應(yīng)的最大特點就是的靈敏性，極其微量的污染就會造成 PCR 實驗結(jié)果的假陽性，因此組合型 PCR 實驗室設(shè)計的問題就是避免交叉污染，而組合型 PCR 實驗室的平面布局模式及各區(qū)域的壓力梯度控制成為了解決這一問題的關(guān)鍵。

現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)《疾病預(yù)防控制中心建筑技術(shù)規(guī)范》GB 50881 對 PCR 實驗室的各項設(shè)計參數(shù)進(jìn)行了規(guī)范與要求，PCR實驗室各區(qū)域并沒有凈化控制要求，但為了避免交叉感染，通常采用全送全排的直流空調(diào)系統(tǒng)，并且需要嚴(yán)格控制好送風(fēng)、排風(fēng)的比例，保證各實驗區(qū)域的壓力梯度。

組合型PCR實驗室的空調(diào)負(fù)荷、換氣次數(shù)等要求與二級生物實驗室原則一致。PCR實驗室的暖通空調(diào)系統(tǒng)需設(shè)置獨立的一套全新風(fēng)空調(diào)系統(tǒng)，PCR實驗室并無空氣凈化的強(qiáng)制性要求，因此只需要設(shè)置初效加中效過濾器即可，不同房間的排風(fēng)宜設(shè)置止回裝置，排風(fēng)機(jī)吸入側(cè)設(shè)置活性炭等生物凈化裝置。

組合型 PCR 實驗室應(yīng)設(shè)置緩沖間，緩沖間在實驗區(qū)與走廊區(qū)域形成一道雙向保護(hù)屏障，既阻止外部環(huán)境的潛在污染物質(zhì)如氣溶膠等進(jìn)入實驗區(qū)，同時又控制實驗（產(chǎn)物分析）的有害物質(zhì)滲入環(huán)境，對實驗區(qū)外部環(huán)境及內(nèi)部試劑均起到了保護(hù)作用。