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沉淀法 miRNA 分離試劑盒50 次價(jià)格

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更新時(shí)間:2017-06-28 10:21:11瀏覽次數(shù):320次

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沉淀法 miRNA 分離試劑盒50 次價(jià)格詳細(xì)介紹:

沉淀法 miRNA 分離試劑盒50 次價(jià)格操作步驟:
1. 勻漿處理:a.組織 將組織在液氮中磨碎,每50-100mg組織加入1ml TRIzol,用勻漿儀進(jìn)行勻漿處理。樣品體積不應(yīng)超過TRIzol體積10℅。
b.單層培養(yǎng)細(xì)胞 直接在培養(yǎng)板中加入TRIzol裂解細(xì)胞,每10cm2面積(即3.5cm直徑的培養(yǎng)板)加1ml,用移液器吸打幾次。TRIzol的用量應(yīng)根據(jù)培養(yǎng)板面積而定,不取決于細(xì)胞數(shù)。TRIzol加量不足可能導(dǎo)致提取的RNA有DNA污染。
c.細(xì)胞懸液 離心收集細(xì)胞,每5-10×106動(dòng)物、植物、酵母細(xì)胞或1×107細(xì)菌細(xì)胞加入1ml TRIzol,反復(fù)吸打。加TRIzol之前不要洗滌細(xì)胞以免mRNA降解。一些酵母和細(xì)菌細(xì)胞需用勻漿儀處理。
2.將勻漿樣品在室溫(15-30℃)放置5分鐘,使核酸蛋白復(fù)合物*分離。
3.可選步驟:如樣品中含有較多蛋白質(zhì),脂肪,多糖或胞外物質(zhì)(肌肉,植物結(jié)節(jié)部分等)可于2-8℃10000×g離心10分鐘,取上清。離心得到的沉淀中包括細(xì)胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。處理脂肪組織時(shí),上層有大量油脂應(yīng)去除。取澄清的勻漿液進(jìn)行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml,劇烈振蕩15秒,室溫放置3分鐘。
6. 2-8℃10000×g離心15分鐘。樣品分為三層:底層為黃色有機(jī)相,上層為無色水相和一個(gè)中間層。RNA主要在水相中,水相體積約為所用TRIzol試劑的60℅。
7. 把水相轉(zhuǎn)移到新管中,如要分離DNA和蛋白質(zhì)可保留有機(jī)相,進(jìn)一步操作見后。用異丙醇沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml異丙醇,室溫放置10分鐘。
8. 2-8℃10000×g離心10分鐘,離心前看不出RNA沉淀,離心后在管側(cè)和管底出現(xiàn)膠狀沉淀。移去上清。
試劑的取用規(guī)則:
(1)試劑不能與手接觸。
(2)要用潔凈的藥勺,量筒或滴管取用試劑,不準(zhǔn)用同一種工具同時(shí)連續(xù)取用多種試劑。取完一種試劑后,應(yīng)將工具洗凈(藥勺要擦干)后,方可取用另一種試劑。
(3)試劑取用后一定要將瓶塞蓋緊,不可放錯(cuò)瓶蓋和滴管,絕不允許張冠李戴,用完后將瓶放回原處
(4)已取出的試劑不能再放回原試劑瓶?jī)?nèi)。
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EphB1+EphB2+EphB3+EphB4
空通氣孔樣蛋白2抗體      EMX2
同源盒蛋白轉(zhuǎn)錄因子EN2抗體      EN2
磷酸化細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶5抗體      phospho-ERK5 (Thr218 + Tyr220)
CD39樣蛋白1抗體      ENTPD2
真核翻譯起始因子5抗體      EIF5
早期B淋巴細(xì)胞因子2抗體      EBF2
ELAVL2蛋白抗體      ELAVL2
ELAVL2+ELAVL4蛋白抗體      ELAVL2 + ELAVL4
同源盒蛋白轉(zhuǎn)錄因子EN1抗體      Engrailed 1
轉(zhuǎn)錄因子ER81蛋白抗體      ER81
*受體KA1抗體      EAA1
真核翻譯起始因子3K抗體      eIF3K
早期生長(zhǎng)反應(yīng)蛋白3抗體      EGR3
EMSY蛋白抗體      EMSY
FBXO36 F-box蛋白相關(guān)蛋白36抗體      FBXO36
CAST1蛋白抗體      ERC2
RAB6蛋白抗體      ERC1
皮卡丘素抗體      EGFLAM
ELAVL4蛋白抗體      ELAVL4
表皮生長(zhǎng)因子樣激素受體1      EMR1
磷酸化絲裂原活化蛋白激酶1/2抗體      phospho-ERK1 (Thr197 +Thr202)
電子轉(zhuǎn)移黃素蛋白α抗體      ETFA
前列腺素E受體蛋白4抗體  
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M02468 Rat Gamma-aminobutyric acid,GABA ELISA Kit 大鼠γ氨基丁酸(GABA)ELISA試劑盒
M02469 Rat 5-Hydroxytryptamine,5HT ELISA Kit 大鼠5羥色胺(5-HT)ELISA試劑盒
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M02471 Rat Substance P,SP ELISA Kit 大鼠P物質(zhì)(SP)ELISA試劑盒
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RNA 溶解液10mL規(guī)格

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