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磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶試劑盒100管/96樣說明書

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所在地上海市

更新時間:2017-06-14 11:52:43瀏覽次數(shù):300次

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產(chǎn)品名稱:磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶試劑盒100管/96樣說明書
規(guī)格:100管/96樣
測試方法:微量法
 PEPCK(EC 4.1.1.32)廣泛存在于動物、植物、微生物和細胞中,催化草酰乙酸轉(zhuǎn)化為磷酸烯醇式丙酮酸,是調(diào)節(jié)糖異生途徑的關鍵酶。
測定原理:
PEPCK催化草酰乙酸生成磷酸烯醇式丙酮酸和CO2,丙酮酸激酶和乳酸脫氫酶進一步依次催化NADH氧化生成NAD+,在340nm下測定NADH下降速率,即可反映PEPCK活性。
需自備的儀器和用品:
分光光度計/酶標儀、臺式離心機、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。
樣本處理方法:
1、血清(漿)樣品:直接檢測。
2、細菌、細胞或組織樣品的制備: 
細菌或培養(yǎng)細胞:先收集細菌或細胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細菌或細胞數(shù)量
(104個):提取液體積(mL)為500~1000:1 的比例(建議 500萬細菌或細胞加入 1mL提取液) ,超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率20%或200W,超聲 3s,間隔10s,重復30 次)8000g 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。 
組織:按照組織質(zhì)量(g) :提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g組織,
加入 1mL提取液),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。 
試劑使用須知:
(1)請參照相關法規(guī)、文獻、MSDS等信息,理解并掌握好試劑的特性,再進行安全操作。
(2)通常購買試劑時一定要想到一次性用完。若估算不足有剩余的話,更加注意其他保管和管理。
(3)萬一試劑操作者并非專業(yè)技術(shù)人員。必須在專業(yè)人士的指導監(jiān)督下進行操作。對于使用后的廢棄物,不要或者舊的試劑,應按照相關法律法規(guī)正當處理。
(4)購買后,請務必確認標簽上的注意事項;做好預防顛倒,摔壞的措施和管理體制;在使用前再次確認標簽上的注意事項,做好必要的安全對策;對沒有標明其危害特性、有害特性的,也要慎重地進行操作;必須帶好防護用具,小心翼翼進行操作。
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