背景介紹：TNFRSF18 or GITR (glucocorticoid-induced TNF receptor family-regulated gene) is a 25 kD TNF receptor superfamily member (also known as AITR and TNFRSF18) originally identified in the mouse by comparing untreated and dexamethasone-treated murine T cell hybridoma cells. Human GITR was subsequently identified by searching an expressed sequence tag database. GITR is expressed on activated lymphocytes and is upregulated by T cell receptor engagement. The cytoplasmic domain of GITR is homologous to CD40, 4-1BB and CD27 and has been shown to interact with TRAF 1-3, but not TRAF 5 or 6. GITR signaling has been shown to regulate T cell proliferation and TCR-mediated apoptosis, and to break immunological self-tolerance. GITR appears to be highly expressed on CD4+CD25+ T regulatory cells and has been shown to induce NF-kB activation through TRAF2/NIK signaling. GITR has been proposed to be involved in the development of regulatory T cells and to regulate the activity of Th1 subsets. GITR binds GITRL, a TNF superfamily ligand expressed on endothelial cells, dendritic cells, macrophages, and B cells.

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糖皮質激素誘導腫瘤壞死因子受體抗體,Anti-TNFRSF18抗體-上海研盟生物有限公司優(yōu)質*產(chǎn)品。我公司銷售國內外科研產(chǎn)品，如生物試劑、生化試劑，一抗二抗，各種標記抗體，Elisa酶聯(lián)免疫試劑盒，放免試劑盒，培養(yǎng)基，各種動物血清等產(chǎn)品，歡迎廣大新老客戶前來咨詢訂購。

中文名稱：糖皮質激素誘導腫瘤壞死因子受體抗體

英文名稱：Anti-TNFRSF18 antibody

規(guī)格：0.1ml/0.2m

濃度：1mg/1ml

抗體來源：本公司抗體有兔來源和鼠來源等

克隆類型：兔來源為多抗，鼠來源為單抗

產(chǎn)品類型：一抗

糖皮質激素誘導腫瘤壞死因子受體抗體,Anti-TNFRSF18抗體簡單介紹：

別 名：Activation inducible TNFR family receptor; Activation-inducible TNFR family receptor; CD357; AITR; GITR; GITR D; GITR-D; GITRD; Glucocorticoid induced TNFR related protein; glucocorticoid-induced tnf receptor ligand; Glucocorticoid induced TNFR related protein; TNF receptor superfamily activation inducible protein; Glucocorticoid-induced TNFR-related protein; TNF receptor superfamily activation inducible protein; TNR18_HUMAN; TNFRSF 18; TNFRSF18; Tumor necrosis factor receptor superfamily member 18; Tumor necrosis factor receptor superfamily member 18 precursor.   

此產(chǎn)品本公司有標記的一抗出售，相關標記有：Alexa Fluor 350 標記、Alexa Fluor 488 標記、Alexa Fluor 555 標記、Alexa Fluor 647 標記、AP標記、APC標記、Biotin標記、Cy3標記、Cy5標記、Cy5.5標記、Cy7標記、FITC標記、Gold標記、HRP標記、PE標記、PE-Cy3標記、PE-CY5標記、PE-CY5.5標記、PE-CY7標記、RBITC標記

各種HRP酶標記成抗體的效價測定程序如下（如：羊抗鼠IgG-HRP的效價測定）：

1、抗原包板：15ug/ml 小鼠IgG-pH9.6·CB液 0.1ml/孔；

2、37°C包被60min或4°C過夜；

3、PBST洗板3次，5min/次；

4、加入倍比稀釋的HRP標記抗體 0.1ml/孔；

5、37°C 30min；

6、PBST洗板5min/次×3；

7、底物液0.1ml/孔 37°C 5-10min；

8、終止液：2N H2SO4 0.05ml/孔；

9、450nm 測定OD值；

陽性OD值比對照值大3倍，為判斷效價稀釋度。

免疫印跡法是一種通過凝膠電泳分離蛋白質并通過電轉移把蛋白質轉移到吸附膜上。一經(jīng)蛋白印跡后，即可通過特異性的標記抗體檢測到相應蛋白質。

    十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳（SDS-PAGE）可用于檢測已被SDS化學變性的蛋白。然而，某些特定的抗體不會在一個變性的蛋白質分子上識別其抗原表位，這時需要進行不含SDS的聚丙烯酰胺凝膠電泳。

    蛋白印跡轉膜可以通過濕法或半干法進行。在前者，凝膠夾在印跡膜和各種過濾裝置中間，然后把整個裝置埋進一個裝滿Tris轉移緩沖的電極槽中。在后者，夾在中間的凝膠周圍只有少量的緩沖液，然后封閉在電極板之間。雖然半干法轉膜較快，但需要很好地擬合各部分的夾層配件，而濕法轉膜很少會出現(xiàn)問題，可以盡量保持重復實驗結果的*性。此外，如果半干法轉膜時間過長，較小分子量的蛋白質可能會從膜上轉過。

    轉膜后，需對膜進行封閉，以減少非特異性蛋白結合，然后進行用一抗孵育膜，以研究感興趣的目標蛋白。單克隆抗體通常具有更高的特異性；然而許多單克隆抗體產(chǎn)生于某個特定肽段而不是一個天然蛋白質，因此可能無法檢測到PAGE所分離的天然蛋白。也可使用多克隆抗體，但易形成較高的背景值。因一抗通常無標記，所以需要一個可以結合在一抗Fc段的標記的二抗，以用于zui后的檢測。通常會用酶來標記二抗。酶標記后的印跡可通過化學發(fā)光酶底物及放射自顯影技術成像。被抗體檢測和標記到的蛋白質會出現(xiàn)在圖像的暗區(qū)。

斑點印跡法類似于免疫印跡法，在膜上檢測目標蛋白；但是斑點印跡法中檢測的蛋白質不用電泳進行分離。取而代之的是，含有目標蛋白的樣品被直接“點”到膜上，這不能做到定量檢測，但它可以直接檢測某種特定蛋白的有無。例如，斑點印跡法可用于檢測蔗糖梯度分離的細胞裂解產(chǎn)物中的某些蛋白質定位。

糖皮質激素誘導腫瘤壞死因子受體抗體保存條件：Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -20°C. When reconstituted in sterile pH 7.4 0.01M PBS or diluent of antibody the antibody is stable for at least two weeks at 2-4 °C.

避免反復凍融，保質期一年。

免疫印跡試驗常見的問題及原因

微弱的條帶（weak single）

可能存在的原因：蛋白與抗體結合率低  

解決方法:較少洗膜次數(shù)或者縮短洗膜時間；

降低洗膜液中NaCl的濃度（0.15M-0.5M）；

降低抗體稀釋液中NaCl的濃度（0.15M-0.5M）

可能存在的原因：抗體量不足 

解決方法:抗體和蛋白的結合較低，可將抗體濃度調整至初始濃度的2-4倍

可能存在的原因：蛋白量不足 

解決方法:增加蛋白上樣量

可能存在的原因：酶和底物時效   

解決方法:將酶和底物進行反應，觀察現(xiàn)象，出現(xiàn)異常，則需要重新標記或者購買

可能存在的原因：過期或者陳舊的ECL發(fā)光液 

解決方法:更換的新的ECL發(fā)光液

可能存在的原因：脫脂奶粉可能會掩蓋一些抗原   

解決方法:降低牛奶的百分比或者用BSA代替

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