背景介紹:TWEAK (otherwise known as TNFRSF12A, Tumor necrosis factor receptor superfamily member 12A), is a member of the TNF family and was first described as a weak inducer of apoptosis in some cell types. It is thought to promote angiogenesis and the proliferation of endothelial cells as well as modulating cellular adhesion to matrix proteins. Recently, a receptor for TWEAK was isolated by expression cloning from a HUVEC cell cDNA library.
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腫瘤壞死因子配體超家族成員12A抗體,Anti-TNFRSF12A抗體-上海研盟生物有限公司優(yōu)質(zhì)*產(chǎn)品。我公司銷售國內(nèi)外科研產(chǎn)品,如生物試劑、生化試劑,一抗二抗,各種標記抗體,Elisa酶聯(lián)免疫試劑盒,放免試劑盒,培養(yǎng)基,各種動物血清等產(chǎn)品,歡迎廣大新老客戶前來咨詢訂購。
中文名稱:腫瘤壞死因子配體超家族成員12A抗體
英文名稱:Anti-TNFRSF12A antibody
規(guī)格:0.1ml/0.2m
濃度:1mg/1ml
抗體來源:本公司抗體有兔來源和鼠來源等
克隆類型:兔來源為多抗,鼠來源為單抗
產(chǎn)品類型:一抗
腫瘤壞死因子配體超家族成員12A抗體,Anti-TNFRSF12A抗體簡單介紹:
別 名:CD 266; CD266; CD266 antigen; TWEAKR; FGF inducible 14; FGF-inducible 14; Fibroblast growth factor inducible immediate early response protein 14; Fibroblast growth factor-inducible immediate-early response protein 14; FN 14; FN14; TNFRSF 12A; TNFRSF12A; TNR12_HUMAN; Tumor necrosis factor receptor superfamily member 12A; TWEAK R; Tweak receptor; Tweak-receptor; TweakR; Type I transmembrane protein Fn 14; Type I transmembrane protein Fn14.
此產(chǎn)品本公司有標記的一抗出售,相關(guān)標記有:Alexa Fluor 350 標記、Alexa Fluor 488 標記、Alexa Fluor 555 標記、Alexa Fluor 647 標記、AP標記、APC標記、Biotin標記、Cy3標記、Cy5標記、Cy5.5標記、Cy7標記、FITC標記、Gold標記、HRP標記、PE標記、PE-Cy3標記、PE-CY5標記、PE-CY5.5標記、PE-CY7標記、RBITC標記
Western,也稱Western blot、Western blotting、Western 印跡,是用抗體檢測蛋白的重要方法之一。
WB實驗注意事項
1、 把聚丙烯酰胺凝膠中的蛋白質(zhì)電泳轉(zhuǎn)移到硝酸纖維膜上;
a. 轉(zhuǎn)移緩沖液洗滌凝膠和硝酸纖維素膜,將硝酸纖維素膜鋪在凝膠上,用5ml移液管在凝膠上來回滾動去除所有的氣泡
b. 在凝膠/濾膜外再包一張3mm濾紙(預先用轉(zhuǎn)移緩沖液浸濕),將凝膠夾在中間,保持濕潤和沒有氣泡
c. 將此濾紙/凝膠/薄膜濾紙按照廠家建議方法放入電泳裝置中,凝膠面向陰極
d. 將上述裝置放入緩沖液槽中,并灌滿轉(zhuǎn)移緩沖液以淹沒凝膠
e. 按照廠家所示接通電源開始電泳轉(zhuǎn)移
f. 轉(zhuǎn)移結(jié)束后,取出薄膜和凝膠,棄去凝膠
2、 將薄膜漂在氨基黑中快速染色,直至分子量標準顯現(xiàn)時取出,記錄下標準位置;
3、 用100ml水洗滌纖維素膜,必要時可用脫色緩沖液;
4、 膜置印跡緩沖液中于37℃保溫1小時;
5、 室溫下,用PBS-Tween緩沖液洗滌薄膜
6、 用封口機將薄膜封入塑料袋中,盡可能不留空氣;
7、 袋的一角剪一緩沖液的小口,用透析袋夾緊;
8、 混合:NGS(100微升),印跡緩沖液中的抗體(2.5-5毫升),加在裝薄膜的袋中,于室溫下?lián)u動2小時(或4℃過夜);
9、 用總體積300ml PBS-Tween緩沖液,分4次在一淺盤中洗滌薄膜,每次75ml;
10、將連接*的羊抗兔IgG(40微升溶于10毫升印跡緩沖液/100微升 NGS)加在袋內(nèi),于室溫下?lián)u動1小時;
11、按步驟9洗滌;
12、加入抗生素蛋白-HRP(40微升溶于10毫升印跡緩沖液/100微升 NGS),于室溫下?lián)u動;
13、Western Blot中轉(zhuǎn)移在膜上的蛋白處于變性狀態(tài),空間結(jié)構(gòu)改變,因此那些識別空間表位的抗體不能用于Western Blot檢測。這種情況可以將表達目的蛋白的細胞或細胞裂解液中的所有蛋白物素化,再用酶標記親和素進行Western Blot。實驗中取膠和膜需帶手套。
腫瘤壞死因子配體超家族成員12A抗體保存條件:Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -20°C. When reconstituted in sterile pH 7.4 0.01M PBS or diluent of antibody the antibody is stable for at least two weeks at 2-4 °C.
避免反復凍融,保質(zhì)期一年。
免疫組化問題解答
1、染色弱?
原因:抗體濃度過低、孵育時間過短
解決方法:提高抗體濃度、孵育時間不能少于60分鐘
原因:試劑超過有效使用時間
解決方法:應(yīng)更換試劑
原因:操作中添加試劑時緩沖液未瀝干
解決方法:每步滴加試劑前瀝干切片中多余的緩沖液 使試劑稀釋 (應(yīng)防止切片干燥)
原因:室溫太低,低于15度
解決方法:要改放在37度孵育箱孵育30-60分鐘或4度冰箱過夜
原因:蛋白封閉過度
解決方法:封閉不要超過12分鐘
染色陰性?
原因:操作步驟錯誤
解決方法:應(yīng)重試,設(shè)陽性對照
原因:組織中無抗原
解決方法:設(shè)陽性對照以驗證試驗結(jié)果
原因:一抗與二抗種屬連接錯誤
解決方法:仔細確定一抗二抗種屬無誤
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