背景介紹:The product of this gene phosphorylates the beta-2-adrenergic receptor and appears to mediate agonist-specific desensitization observed at high agonist concentrations. This protein is an ubiquitous cytosolic enzyme that specifically phosphorylates the activated form of the beta-adrenergic and related G-protein-coupled receptors. Abnormal coupling of beta-adrenergic receptor to G protein is involved in the pathogenesis of the failing heart.
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G蛋白偶合受體激酶2抗體,Anti-GRK2抗體-上海研盟生物有限公司優(yōu)質(zhì)*產(chǎn)品。我公司銷售國(guó)內(nèi)外科研產(chǎn)品,如生物試劑、生化試劑,一抗二抗,各種標(biāo)記抗體,Elisa酶聯(lián)免疫試劑盒,放免試劑盒,培養(yǎng)基,各種動(dòng)物血清等產(chǎn)品,歡迎廣大新老客戶前來咨詢訂購(gòu)。
中文名稱:G蛋白偶合受體激酶2抗體
英文名稱:Anti-GRK2 antibody
規(guī)格:0.1ml/0.2m
濃度:1mg/1ml
抗體來源:本公司抗體有兔來源和鼠來源等
克隆類型:兔來源為多抗,鼠來源為單抗
產(chǎn)品類型:一抗
G蛋白偶合受體激酶2抗體,Anti-GRK2抗體簡(jiǎn)單介紹:
別 名:G-protein coupled receptor kinase 2; ADRBK 1; ADRBK1; Adrenergic beta receptor kinase 1; BARK 1; BARK; BARK1; Beta adrenergic receptor kinase 1; Beta ARK 1; Beta ARK1; G Protein Coupled Receptor Kinase 2; G protein dependent receptor kinase 2; FLJ16718; GRK 2; ARBK1_HUMAN.
此產(chǎn)品本公司有標(biāo)記的一抗出售,相關(guān)標(biāo)記有:Alexa Fluor 350 標(biāo)記、Alexa Fluor 488 標(biāo)記、Alexa Fluor 555 標(biāo)記、Alexa Fluor 647 標(biāo)記、AP標(biāo)記、APC標(biāo)記、Biotin標(biāo)記、Cy3標(biāo)記、Cy5標(biāo)記、Cy5.5標(biāo)記、Cy7標(biāo)記、FITC標(biāo)記、Gold標(biāo)記、HRP標(biāo)記、PE標(biāo)記、PE-Cy3標(biāo)記、PE-CY5標(biāo)記、PE-CY5.5標(biāo)記、PE-CY7標(biāo)記、RBITC標(biāo)記
Western,也稱Western blot、Western blotting、Western 印跡,是用抗體檢測(cè)蛋白的重要方法之一。
WB實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)
1、 把聚丙烯酰胺凝膠中的蛋白質(zhì)電泳轉(zhuǎn)移到硝酸纖維膜上;
a. 轉(zhuǎn)移緩沖液洗滌凝膠和硝酸纖維素膜,將硝酸纖維素膜鋪在凝膠上,用5ml移液管在凝膠上來回滾動(dòng)去除所有的氣泡
b. 在凝膠/濾膜外再包一張3mm濾紙(預(yù)先用轉(zhuǎn)移緩沖液浸濕),將凝膠夾在中間,保持濕潤(rùn)和沒有氣泡
c. 將此濾紙/凝膠/薄膜濾紙按照廠家建議方法放入電泳裝置中,凝膠面向陰極
d. 將上述裝置放入緩沖液槽中,并灌滿轉(zhuǎn)移緩沖液以淹沒凝膠
e. 按照廠家所示接通電源開始電泳轉(zhuǎn)移
f. 轉(zhuǎn)移結(jié)束后,取出薄膜和凝膠,棄去凝膠
2、 將薄膜漂在氨基黑中快速染色,直至分子量標(biāo)準(zhǔn)顯現(xiàn)時(shí)取出,記錄下標(biāo)準(zhǔn)位置;
3、 用100ml水洗滌纖維素膜,必要時(shí)可用脫色緩沖液;
4、 膜置印跡緩沖液中于37℃保溫1小時(shí);
5、 室溫下,用PBS-Tween緩沖液洗滌薄膜
6、 用封口機(jī)將薄膜封入塑料袋中,盡可能不留空氣;
7、 袋的一角剪一緩沖液的小口,用透析袋夾緊;
8、 混合:NGS(100微升),印跡緩沖液中的抗體(2.5-5毫升),加在裝薄膜的袋中,于室溫下?lián)u動(dòng)2小時(shí)(或4℃過夜);
9、 用總體積300ml PBS-Tween緩沖液,分4次在一淺盤中洗滌薄膜,每次75ml;
10、將連接*的羊抗兔IgG(40微升溶于10毫升印跡緩沖液/100微升 NGS)加在袋內(nèi),于室溫下?lián)u動(dòng)1小時(shí);
11、按步驟9洗滌;
12、加入抗生素蛋白-HRP(40微升溶于10毫升印跡緩沖液/100微升 NGS),于室溫下?lián)u動(dòng);
13、Western Blot中轉(zhuǎn)移在膜上的蛋白處于變性狀態(tài),空間結(jié)構(gòu)改變,因此那些識(shí)別空間表位的抗體不能用于Western Blot檢測(cè)。這種情況可以將表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞或細(xì)胞裂解液中的所有蛋白物素化,再用酶標(biāo)記親和素進(jìn)行Western Blot。實(shí)驗(yàn)中取膠和膜需帶手套。
G蛋白偶合受體激酶2抗體保存條件:Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -20°C. When reconstituted in sterile pH 7.4 0.01M PBS or diluent of antibody the antibody is stable for at least two weeks at 2-4 °C.
避免反復(fù)凍融,保質(zhì)期一年。
免疫組化問題解答
1、染色弱?
原因:抗體濃度過低、孵育時(shí)間過短
解決方法:提高抗體濃度、孵育時(shí)間不能少于60分鐘
原因:試劑超過有效使用時(shí)間
解決方法:應(yīng)更換試劑
原因:操作中添加試劑時(shí)緩沖液未瀝干
解決方法:每步滴加試劑前瀝干切片中多余的緩沖液 使試劑稀釋 (應(yīng)防止切片干燥)
原因:室溫太低,低于15度
解決方法:要改放在37度孵育箱孵育30-60分鐘或4度冰箱過夜
原因:蛋白封閉過度
解決方法:封閉不要超過12分鐘
染色陰性?
原因:操作步驟錯(cuò)誤
解決方法:應(yīng)重試,設(shè)陽性對(duì)照
原因:組織中無抗原
解決方法:設(shè)陽性對(duì)照以驗(yàn)證試驗(yàn)結(jié)果
原因:一抗與二抗種屬連接錯(cuò)誤
解決方法:仔細(xì)確定一抗二抗種屬無誤
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