背景介紹:LCE1A belongs to the late cornified envelope (LCE) genecluster within the epidermal differentiation complex (EDC) onchromosome 1. The LCE cluster contains multiple conserved genesthat encode stratum corneum proteins, and these genes are expressedrelatively late during fetal assembly of the skin cornifiedenvelope (Jackson et al., 2005 [PubMed 15854049]). For furtherinformation on the LCE gene cluster, see GENE FAMILYbelow
晚期包膜蛋白1抗體,Anti-LCE1A抗體簡單介紹:
別 名:Late cornified envelope 1A; Late cornified envelope protein 1A; Late envelope protein 1; LCE1A; LCE1A_HUMAN; LEP1
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中文名稱:晚期包膜蛋白1抗體
英文名稱:Anti-LCE1A antibody
規(guī)格:0.1ml/0.2ml
濃度:1mg/1ml
抗體來源:本公司抗體有兔來源和鼠來源等
克隆類型:兔來源為多抗,鼠來源為單抗
產(chǎn)品類型:一抗
抗原修復(fù)(免疫組化石蠟切片)
用于福爾馬林固定的石蠟包埋組織芯片需要抗原修復(fù)。
福爾馬林固定的組織有可能破壞了原來組織的抗原結(jié)構(gòu),蛋白多肽發(fā)生交聯(lián),導(dǎo)致部分抗原表位封閉,結(jié)合位點減少,所以需要抗原修復(fù),以暴露原來的抗原表位,達(dá)到充分顯露抗原,以不出現(xiàn)明顯脫片現(xiàn)象為佳。
抗原修復(fù)的幾種常用方法(供參考)
1、 微波爐加熱:
在微波爐里加熱0.01*緩沖液(pH6.0)至沸騰后將組織芯片放入,斷電,間隔5-10分鐘,反復(fù)1-2次。根據(jù)玻片情況可參考采用微波加熱“3-5-3法”3分鐘溫火沸騰后靜止5分鐘,再溫火沸騰3分鐘即可。
適用的抗原:來源于人、大鼠、小鼠的組織標(biāo)本;來源于其他動物種屬的組織標(biāo)本。
2、 沸熱修復(fù):
電爐或水浴鍋加熱0.01M*緩沖液(pH6.0)至95℃左右,放入組織芯片加熱10-15分鐘。
3、 高壓熱修復(fù):
在沸水中加入EDTA(pH8.0)或0.01m*緩沖溶液(pH6.0).蓋上不銹鋼鍋蓋,但不能鎖定。將玻片置于金屬染色架上,緩慢加壓,使玻片在緩沖液中浸泡五分鐘,然后將蓋子鎖定,小閥門將會升起來。10分鐘后除去熱源,置入涼水中,當(dāng)小閥門沉下去后打開蓋子。此方法適用于較難檢測或核抗原的抗原修復(fù)。(骨及軟骨組織的標(biāo)本選擇較溫和的微波加熱修復(fù)) 。
4、 酶消化方法:
常用0.1%*和0.4%*液。*使用前預(yù)熱37℃,消化時間約為5-30分鐘。
適用于被固定遮蔽的抗原:包括 Collagen.GFAP. Complement.Cytokeratin.c-erB-2.LCA.LN.等。
晚期包膜蛋白1抗體保存條件:Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -20°C. When reconstituted in sterile pH 7.4 0.01M PBS or diluent of antibody the antibody is stable for at least two weeks at 2-4 °C.
避免反復(fù)凍融,保質(zhì)期一年。
免疫組化問題解答
1、染色過強?
原 因:抗體濃度過高或孵育時間過長
解決方法:降低抗體滴度、抗體孵育時間:室溫1小時或4度過夜
原 因:孵育溫度過高超過37度
解決方法:一般在室溫20-28度
原 因:DAB顯色時間過長或濃度過高
解決方法:顯色時間不超過5-12分鐘,以顯微鏡下觀察為準(zhǔn)
2、非特異性背景染色?
原 因:操作過程中沖洗不充分
解決方法:每步?jīng)_洗3次每次5分鐘
原 因:組織中含過氧化物酶未阻斷
解決方法:可再配置新鮮3%H2O2封閉孵育時間延長
原 因:組織中含內(nèi)原性*
解決方法:正常非免疫動物血清再封閉
原 因:血清蛋白封閉不充分
解決方法:血清蛋白封閉不充分
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