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大鼠神經(jīng)細胞粘附分子(NCAM)ELISA試劑盒的洗滌

洗滌是ELISA實驗中是zui多次數(shù)的操作，也是非常重要的步驟。不嚴格的洗滌容易出現(xiàn)洗不干凈或交叉污染現(xiàn)象，實驗重復效果差的現(xiàn)象。不管用多道加樣器、洗瓶、吸管，還是洗板機，嚴格按照說明書操作不要減少步驟洗滌的洗滌體積、洗滌時間和洗滌次數(shù)。注意標準化操作將減少實驗誤差和不同實驗之間的誤差。操作者常出現(xiàn)洗板不干凈現(xiàn)象，請比照操作：

a)洗液不要溢出孔外，以免污染相鄰的孔，特別是每次洗板的前兩遍，若高濃度的孔污染了低濃度的孔或空白孔，其造成的交叉污染的孔是洗不掉的，背景肯定會增高。

b)特別注意：設計實驗的時候要考慮實驗孔的位置，保證甩掉洗液時，空白孔、低濃度孔或陰性對照組在上面或一側或分開。同時注意甩掉洗液的動作翻轉(從正上方旋轉120-150度)要迅速、干脆。甩板不要手腕左右搖擺、旋轉來甩液體!甩出后以直線方式補2-3次甩出液體。

c)用干凈的濾紙，不要用衛(wèi)生紙，因為細小粉塵或者碎屑容易吸附到孔底，導致洗板不干凈，結果偏高或偏低，重復孔的數(shù)值也會相差很大。

d)每次拍板不要重復在一個地方拍，特別是洗去酶的步驟;拍板不宜過輕，否則拍不干凈，拍板很用力不會對蛋白有什么影響。但注意不要太重，以至把板條給拍斷。每次洗板后輕叩幾下，zui后一次一定要扣干凈。

e)不能減少洗液體積、洗板時間和次數(shù)。洗板時間太短，洗板效果不佳。延長洗板時間和增加洗板次數(shù)可以使背景更干凈。

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技術問答：

問：建議標準做復嗎?

答：標準品做復孔是的

問：36個樣品，定96T的，可以測一個重復吧

答：可以

問：Elisa方法的不測人血小板第四因子里IgG抗體的滴度嗎?

答：Elisa不測滴度的，熒光法可以測

問：酶標板不平，影響結果嗎。

答：不影響結果的。