上海研盟生物有限公司*品質(zhì)供應(yīng)Anti-RNF158抗體,我公司銷售國內(nèi)外科研產(chǎn)品,如生物試劑、生化試劑,一抗二抗,各種標(biāo)記抗體,Elisa酶聯(lián)免疫試劑盒,放免試劑盒,培養(yǎng)基,各種動(dòng)物血清等產(chǎn)品,歡迎廣大新老客戶前來咨詢訂購,訂購:或。
心臟蛋白磷酸酶1結(jié)合蛋白抗體,Anti-RNF158抗體簡單介紹:
【中文名稱】:心臟蛋白磷酸酶1結(jié)合蛋白/環(huán)指蛋白158抗體
【英文名稱】:Anti-RNF158抗體
【別 名】:Heart protein phosphatase 1-binding protein; HEPP1; Putative E3 ubiquitin protein ligase SH3RF2; Putative E3 ubiquitin-protein ligase SH3RF2; RING finger protein 158; SH3 domain containing RING finger protein 2; SH3 domain-containing RING finger protein 2; SH3R2_HUMAN; Sh3rf2.
【規(guī) 格】:0.1ml/0.2ml
【相關(guān)標(biāo)記】:Alexa Fluor 350、Alexa Fluor 488、Alexa Fluor 555、Alexa Fluor 647、AP、APC、Biotin、Cy3、Cy5、Cy5.5、Cy7、FITC、Gold、HRP、PE、PE-Cy3、PE-CY5、PE-CY5.5、PE-CY7、RBITC.
【濃 度】:1mg/1ml
【抗體來源】:Rabbit or Mouse or Goat
【克隆類型】:polyclonal or monoclonal
【產(chǎn)品類型】:一抗
【產(chǎn)品應(yīng)用】:可以用于做石蠟切片免疫組化,冰凍切片免疫組化,Elisa,WB,免疫熒光、流式細(xì)胞術(shù)等實(shí)驗(yàn)。
心臟蛋白磷酸酶1結(jié)合蛋白抗體背景介紹:The RING-type zinc finger motif is present in a number of viral and eukaryotic proteins and is made of a conserved cysteine-rich domain that is able to bind two zinc atoms. Proteins that contain this conserved domain are generally involved in the ubiquitination pathway of protein degradation. SH3RF2 (SH3 domain containing ring finger 2), also known as RNF158, is a 729 amino acid protein with one RING-type zinc finger domain and three SH3 domains. Via its RING-type zinc finger domain, SH3RF2 binds an E2 ubiquitin-conjugating enzyme. This suggests that SH3RF2 functions as an E3 ubiquitin-protein ligase that accepts a ubiquitin residue from an E2 ubiquitin-conjugating enzyme and immediay transfers that residue to a protein that is targeted for degradation. Due to alternative splicing events, SH3RF2 is expressed as two different isoforms.
有關(guān)免疫組化實(shí)驗(yàn)的重要問題:
(一)組織材料處理
1.取材要取新鮮組織,大小合適,用生li鹽水洗凈
2.固定固定就是把病理標(biāo)本組織浸泡在固定液中(常用的有4%多聚甲醛),使組織或細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)凝聚、沉淀或變性成為不溶性物質(zhì),并保持細(xì)胞原有的形態(tài)結(jié)構(gòu)
3.洗滌固定后一定要把滲透到組織里面的固定液洗去,以利于進(jìn)行脫水,若組織中留有較多的固定液,則將影響脫水劑,甚至可在組織中發(fā)生沉淀而影響后續(xù)染色及觀察,對(duì)于陳舊性標(biāo)本或固定時(shí)間過長的標(biāo)本,更應(yīng)注意流水沖洗。
4.脫水脫水必須*,若脫水不盡,則切片后組織與空氣接觸即干燥收縮,蠟塊切面出現(xiàn)凹陷現(xiàn)象,雖可勉強(qiáng)切片,但染色效果差,染色時(shí)也容易脫落
5.透明乙醇等脫水劑不能溶解石蠟,所以浸蠟之前需要一個(gè)既能與乙醇混合又能溶解石蠟的媒劑,以便使石蠟浸入到組織中去,當(dāng)組織中全部被透明劑占有時(shí),光線可以透過,組織可呈現(xiàn)不同程度的透明狀態(tài),此現(xiàn)象稱為透明。如果組織不能透明,表明脫水未盡必須重新返工,否則影響到浸蠟的進(jìn)行,但返工時(shí)往往效果不好
6.浸蠟浸蠟時(shí)間根據(jù)組織的類型可適當(dāng)調(diào)整,一般原則較小組織脫水時(shí)間和浸蠟時(shí)間較短;骨、肌肉等堅(jiān)硬組織脫水和浸蠟時(shí)間不宜過長;脂肪組織、疏松結(jié)締組織脫水和浸蠟時(shí)間需增加
7.包埋包埋時(shí)應(yīng)注意組織的包埋方向,否則將影響組織切片的形態(tài)。包埋用的石蠟要和浸蠟用的石蠟熔點(diǎn)*,包埋用的石蠟溫度要稍高于浸蠟的溫度。包埋好后可置于冷水中使石蠟迅速冷凝。包埋好的石蠟塊應(yīng)呈均勻的半透明狀,如出現(xiàn)白色渾濁則其中存在石蠟的結(jié)晶,這種蠟塊不能切除薄的切片??赡苁墙M織脫水不充分,組織內(nèi)或石蠟中混有透明劑,或包埋時(shí)動(dòng)作太慢或石蠟?zāi)烫?,所以冷卻時(shí)水溫不能過高,否則就不宜迅速凝固
8.切片可以將制作好的蠟塊置于低溫環(huán)境預(yù)冷,切出的切片連續(xù)性較好,有利于展片,一般切片厚度4-6um
心臟蛋白磷酸酶1結(jié)合蛋白抗體,Anti-RNF158抗體抗原修復(fù),必須注意以下問題:
1、修復(fù)液的選擇。
0.01M枸櫞酸(pH6.0):應(yīng)用zui多的抗原修復(fù)液,適用于大多數(shù)的抗原,用該液修復(fù)后的抗原表達(dá)增強(qiáng),抗原的定性和定位很理想,結(jié)果不錯(cuò);
0.05M EDTA(pH8.0):應(yīng)用較多的抗原修復(fù)液,修復(fù)能力較強(qiáng),對(duì)于保存時(shí)間較長的切片或目的蛋白表達(dá)較弱的組織有很好的修復(fù)效果,需要控制好修復(fù)時(shí)間,否則容易出現(xiàn)較重的背景;
0.01M TBS(pH7.4):中性修復(fù)液,適用于大多數(shù)抗原,對(duì)于核定位蛋白有較好的修復(fù)效果;
*:應(yīng)用較多的抗原修復(fù)液,適用于大多數(shù)的抗原,使用溫度37℃,對(duì)于容易脫片的切片有很好的保護(hù)作用。
*:應(yīng)用較多的抗原修復(fù)液,適用于大多數(shù)的抗原
2.抗原熱修復(fù)時(shí)應(yīng)選擇的溫度。
據(jù)實(shí)驗(yàn)認(rèn)為溫度在92℃-98℃是合適的,尤其在95℃為,這是因?yàn)椋海?)這種溫度未達(dá)沸騰,切片不容易脫離載玻片;(2)能夠解離和破壞與蛋白交聯(lián)的甲醛醛鍵等,處理時(shí)可以隨意選擇和確定抗原修復(fù)的作用時(shí)間。如果選擇高壓修復(fù),因?yàn)闇囟容^高,時(shí)間不宜過長
3.抗原修復(fù)時(shí)有效溫度所需持續(xù)時(shí)間根據(jù)各單位的設(shè)備條件以及使用的儀器不同,抗原修復(fù)時(shí)在有效的溫度范圍內(nèi)所持續(xù)的時(shí)間也不一樣。
4.抗原修復(fù)液必須遵循自然降溫規(guī)律,否則效果不好或達(dá)不到抗原修復(fù)的目的。
5.盡量使用足量的抗原修復(fù)液,防止切片干涸。
6.切片必須附貼牢固,否則發(fā)生掉片。
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