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江蘇菲亞生物科技有限公司
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ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)曲線和測定的重復(fù)性差是何原因
2017-3-9 閱讀(706)
ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)曲線和測定的重復(fù)性差，這是什么原因造成的？
答：試驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)曲線和測定的重復(fù)性差，這是典型的由測定操作引起的問題，常見原因如下：
a)可能原因：加樣本及試劑量不準(zhǔn)；孔間不一致；
解決方法：校正移液器，吸嘴要配套，裝吸嘴時(shí)要緊密。
重復(fù)某一樣品時(shí)，加樣時(shí)間盡可能與*次接近；
重復(fù)測定標(biāo)本，操作條件、人員等應(yīng)盡可能與上次保持一致，以排除這些因素造成的不一致的可能性；
樣品稀釋前應(yīng)充分混勻。
b)可能原因：加樣過快，孔間發(fā)生污染；
解決方法：重復(fù)測定標(biāo)本，操作條件、人員等應(yīng)盡可能與上次保持一致，以排除這些因素造成的不一致的可能性；加樣不要過快。
c)可能原因：加錯(cuò)樣本；
解決方法：檢查記錄和試劑，是否加錯(cuò)樣本。
d)可能原因：加樣本及試劑時(shí)，加在孔壁上部非包被區(qū)；
解決方法：加樣槍頭不要貼壁。
e)可能原因：不同批號(hào)試劑盒中組分混用；
解決方法：不同批號(hào)試劑盒中組分不可混用。
f)可能原因：溫育時(shí)間、洗板、顯色時(shí)間不一致；
解決方法：檢查時(shí)間是否一致。
g)可能原因：孔內(nèi)污染雜物；
解決方法：離心樣品，排除雜物。
h)可能原因：試劑/樣品沒有混勻；
解決方法：充分混勻樣品和試劑。
i)可能原因：血清標(biāo)本未*凝固即加入，反應(yīng)孔內(nèi)出現(xiàn)纖維蛋白凝固或殘留血
細(xì)胞，易出現(xiàn)假陽性反應(yīng)等。
解決方法：待血清標(biāo)本*凝固后做試驗(yàn)。
