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江蘇菲亞生物科技有限公司
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保存血清時應該注意哪幾點
2021-12-14 閱讀(1647)
血清的保存應該注意以下幾點：
（1）需要長期保存的血清必須儲存于-20℃-70℃低溫冰箱中。4℃冰箱中保存時間切勿超過1個月，由于血清結冰時體積會增加約10%，因此，血清在凍入低溫冰箱前，必須預留一定體積空間，否則易發(fā)生污染或玻璃瓶凍裂。
（2）熱滅活是指56℃，30分鐘加熱已*解凍的血清。加熱過程中須規(guī)則搖晃均勻，此熱處理的目的是使血清中的補體成分(complement)滅活，除非必須，一般不建議作此熱處理，因為熱處理會造成血清沉淀物顯著增多，而且還會影響血清的質量，補體參與反應有：細胞毒作用，平滑肌細胞收縮，肥大細胞和血小板釋放組胺，增強吞噬作用，促進淋巴細胞和巨噬細胞發(fā)生化學趨化和活化。
（3）瓶裝血清解凍需采用逐步解凍法：-20℃至-70℃ 低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天。然后移入室溫，待全部溶解后再分裝。在溶解過程中需不斷輕輕搖晃均勻（小心勿造成氣泡），使溫度與成分均一，減少沉淀的發(fā)生。切勿直接將血清從-20℃進入37℃解凍，這樣因溫度改變太大，容易造成蛋白質凝集而出現(xiàn)沉淀。
（4）一般廠商提供的血清為無菌，無需再過濾除菌，如發(fā)現(xiàn)血清有懸浮物，則可將血清加入培養(yǎng)液內(nèi)一起過濾,切勿直接過濾血清。
（5）血清中的沉淀物、絮狀物：主要是血清中的脂蛋白變性及解凍后血清中纖維蛋白造成，這些絮狀物不會影響血清本身的質量，可用離心3000rpm，5分鐘去除，也可不用處理，顯微鏡下"小黑點"。經(jīng)過熱處理過的血清，沉淀物的形成會顯著增多。有些沉淀物在顯微鏡下觀察象"小黑點"，常誤認為血清受污染，一般情況下，此小黑點不會影響細胞生長，但如果懷疑血清質量，則應立即停止使用，更換另一批號的血清。
（6）切勿將血清在37℃放置太久，否則血清會變得渾濁，同時血清中的有效成分會破壞而影響血清質量。
