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技術(shù)文章

液相色譜日常簡(jiǎn)易保養(yǎng)及維護(hù)及選購(gòu)指南

閱讀:3          發(fā)布時(shí)間:2025-1-10
1、流動(dòng)相的抽作要求:    液相級(jí)色譜醇,二次蒸餾水,緩沖鹽一定要過(guò)濾;    流動(dòng)相脫氣至關(guān)重要(可采用抽濾,超聲波脫氣等方法)    2、吸濾頭:    特殊情況下可拆下濾頭抽取以判斷其中是否堵塞;亦可用注射器吸取流動(dòng)相通過(guò)吸濾頭打出以判斷其是否堵塞。若有堵塞情況可用異丙醇超聲波清洗;清洗不成功則需要更換?!   ?、單向閥:    如遇到泵壓不穩(wěn)或流動(dòng)相不能抽取,則可能是單向閥出現(xiàn)問(wèn)題,卸下用異丙醇超聲波清洗,清洗時(shí)須按其安裝的方向放置在小燒杯中,切記不可與安裝方向倒置超洗!    4、泵頭:    泵頭漏液或出現(xiàn)其它故障一般要申請(qǐng)維修(如漏液,或更換柱塞桿及其密封墊等)    5、過(guò)濾器:    當(dāng)色譜峰出現(xiàn)異常情況時(shí),有可能是此部件被污染,拆下用異丙醇超洗或更換過(guò)濾墊片?!   ?、排液閥:    此處不能密封或漏液時(shí)一般是其中的墊片污染或磨損,可卸下后取出其墊片用異丙醇超聲波清洗或更換墊圈?!   ?、手動(dòng)進(jìn)樣器:    平時(shí)應(yīng)注意用二次蒸餾水和甲醇在裝載狀態(tài)及進(jìn)樣分析狀態(tài)清洗;如出現(xiàn)漏液現(xiàn)象,原因極可能為轉(zhuǎn)子密封墊磨損或污染,一般須申請(qǐng)維修或更換配件?!   ?、流通池:    在色譜峰不正常時(shí)會(huì)可能是此部件補(bǔ)污染??刹鹦逗笕〕銎渲械膲|片用異丙醇超洗(可根據(jù)說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作或申請(qǐng)維修)?!   ?、工作站:    出現(xiàn)死機(jī)可重起計(jì)算機(jī);不正常運(yùn)行時(shí),首先可更換電腦測(cè)試其硬件故障;或在本機(jī)上重新插拔接口、重新安裝軟件。 關(guān)于液相色譜柱的選擇

液相色譜柱,是一種用于液體色譜分析儀器的部件。那么我們?cè)撊绾蔚娜ミx擇液相色譜柱呢?

下面我們就一起來(lái)看看吧。

在選擇色譜柱之前,先多了解自己的樣品和雜質(zhì),他們的類型結(jié)構(gòu)、極性、酸堿性、分子量大小等等,液相色譜柱決定最終分離效果,所以在選擇色譜柱時(shí)候有必要考慮清楚自己的需求。

首先液相色譜柱目前來(lái)說(shuō)分為正反相色譜柱,正相有SI等,反相有C18等。正相主要分離極性物質(zhì),反相主要分離非極性物質(zhì),氨基柱等主要分離二者之間的。

液相色譜日常簡(jiǎn)易保養(yǎng)及維護(hù)及選購(gòu)指南(圖1)

明確了色譜柱大概功能之后,確認(rèn)下自己樣品信息,基本就有點(diǎn)眉目了,方向?qū)α?,剩下的事情就是?xì)節(jié)了如:鍵合相、粒徑、孔徑、碳載量等

1.樣品是極性的且弱酸性的;就可以選擇C18在99%酸性水溶液條件下檢測(cè),即要選擇承受99%純水且對(duì)極性化合物保留很好的色譜柱

2.如果樣品極性太強(qiáng),或酸性太強(qiáng);可以選擇CN,NH2,或硅膠柱,HILIC(親水色譜),也有使用C18+強(qiáng)陰離子對(duì)試劑或強(qiáng)陰離子交換色譜柱(缺點(diǎn)是離子對(duì)試劑平衡時(shí)間長(zhǎng);

對(duì)流動(dòng)相pH要求比較精密,否則很難重復(fù)實(shí)驗(yàn),另外離子對(duì)試劑很難洗下來(lái),基本上用了離子對(duì)的色譜柱就不能再用于其它實(shí)驗(yàn))

3.若樣品是堿性的;可選擇高純硅膠柱(高純硅膠缺少金屬雜質(zhì),且硅膠端基封尾)或一些經(jīng)過(guò)修飾的C18柱(如極性嵌入技術(shù)或堿去活技術(shù)等);

他們都會(huì)減少堿性化合物的拖尾,一般會(huì)選擇中性或偏堿的條件下做,因?yàn)檫@樣可增加堿性樣品的保留

4.如果堿性化合物的極性太強(qiáng),或堿性太強(qiáng);可以選擇寬pH的C18色譜柱在高pH值檢測(cè)(優(yōu)點(diǎn)是方法開(kāi)發(fā)簡(jiǎn)單;

缺點(diǎn)是目前實(shí)現(xiàn)這一技術(shù)的色譜柱品牌比較少,價(jià)格也高)或者選用HILIC色譜柱(硅膠柱在反相條件下使用;

這也是很經(jīng)典的檢測(cè)堿性樣品的方法)選擇強(qiáng)離子交換柱(缺點(diǎn)是不能用來(lái)分析其它樣品,對(duì)流動(dòng)相pH要求比較精密,否則很難重復(fù)實(shí)驗(yàn))也有使用C18+強(qiáng)陰離子對(duì)試劑或強(qiáng)陰離子交換色譜柱。


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