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實(shí)驗(yàn)步驟:
1) 將所需數(shù)量的板條固定到板架上。
2) 將標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控品和已稀釋好的樣品分別用新的取樣吸頭取25μL加入到相應(yīng)的微孔中。
3) 室溫溫育5分鐘。
4) 在每一微孔中加入200μL酶聯(lián)物。
5) 充分混勻10秒,在這個(gè)步驟*混勻很重要。
6) 室溫孵育60分種。
7) 快速棄去孔內(nèi)反應(yīng)物,每孔用400μL蒸餾水洗板3次,在吸水紙上拍干。注意:洗板步驟是否正確操作會(huì)明顯影響實(shí)驗(yàn)的靈敏度和度。
8) 在每一微孔中加入200μl底物液。
9) 室溫孵育15分種。
10) 加100μl終止液到每個(gè)檢測(cè)孔中終止酶反應(yīng)。
11) 加終止液后10分鐘之內(nèi),用酶標(biāo)儀在450±10nm處測(cè)定OD 值。
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