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ELISA問題總結(jié):
1、在稀釋抗體中加入的蛋白穩(wěn)定劑是什么?
技術(shù)分析:一般就先用一些無關(guān)蛋白,如果不行可以添加少量甘油,再不行的話則需購買專門的穩(wěn)定劑了。
2、在試劑盒的研發(fā)中抗體是zui重要的嗎?
技術(shù)分析:原料zui重要,只要是原料無論抗體和抗原都很重要。
3、ELISA靈敏度是由抗體的特性決定的,那么有否可能通過優(yōu)化各種條件使得成型的試劑盒的靈敏度得到較大的提高?
技術(shù)分析:檢測的靈敏度主要是由原料決定的,但可以通過調(diào)整濃度以及其它條件進(jìn)行改善。
4、OPD比TMB靈敏,那么在顯色系統(tǒng)中為什么不用OPD呢?
技術(shù)分析:現(xiàn)在的國內(nèi)商品試劑盒都使用TMB了,TMB實(shí)際上比OPD靈敏,相對來說OPD比較穩(wěn)定。
ELISA試劑盒技術(shù)人員的心得體會:
1)用固定的幾把移液器,這樣可以盡可能的較少誤差!
2)用任何試劑前都要把試劑混勻,這是因?yàn)榈鞍资呛苋菀壮恋淼模@一點(diǎn)需要您特別注意。
3)濕盒孵育前要先把濕盒放在37℃進(jìn)行溫度平衡,這樣可以減少達(dá)到平衡的時間,也可以避免符合試驗(yàn)溫度的孵育時間不夠。
4)等板底的水珠揮發(fā)以后再讀數(shù),要不會出現(xiàn)負(fù)值的。
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