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上海研盟生物科技有限公司
上海研盟生物科技有限公司
| 參 考 價 | 面議 |
產(chǎn)品型號
品 牌
廠商性質(zhì)生產(chǎn)商
所 在 地上海市
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更新時間：2017-10-20 09:51:40瀏覽次數(shù)：304次
聯(lián)系我時，請告知來自 環(huán)保在線上海研盟生物提供美國ATCC傳代細胞株“RKO-E6人結(jié)腸癌轉(zhuǎn)基因細胞"，進口來源，國內(nèi)保種，活性保證，咨詢：.
【友情提示】：產(chǎn)品價格與說明書請?zhí)砑涌头騺黼娫儍r，索要說明書；
產(chǎn)品名稱：RKO-E6人結(jié)腸癌轉(zhuǎn)基因細胞
細胞特性
產(chǎn)品編號 | 名稱 | 簡稱 | 規(guī)格 | 培養(yǎng)條件 |
YM-2230 | RKO-E6；人結(jié)腸癌轉(zhuǎn)基因細胞 | RKO-E6 | 1×10^6 cells/瓶 | DMEM +10% FBS |
細胞名稱：RKO-E6 人結(jié)腸癌轉(zhuǎn)基因細胞
組織來源：結(jié)腸癌，轉(zhuǎn)染插入到pCMV中的HPV E6
培養(yǎng)條件：MEM +10% FBS
形 態(tài)：貼壁；上皮細胞樣
基本特性：
描述：（1）所有細胞株購自ATCC；
（2） 公司可提供新鮮或凍存細胞株；
（3） 細胞株數(shù)量約 1000000個/瓶；
（4） 不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌
密度超過90%,并且細胞狀態(tài)很好時,則復(fù)溫后2個小時需要立即傳代，提供復(fù)蘇好的細胞株，貼壁及懸浮細胞形式，細胞狀態(tài)良好，飽滿、光澤度好，*，并提供細胞報價、所需培養(yǎng)基、種屬來源、組織來源、形態(tài)、背景資料等。
RKO-E6人結(jié)腸癌轉(zhuǎn)基因細胞復(fù)蘇方法細胞用途：僅供科研使用。
1．從液氮罐中取出安剖；有時因安剖未封嚴，浸入了液氮，取出后因安剖內(nèi)液氮迅速氣化而發(fā)生爆炸，因此應(yīng)帶有防護眼睛和手套。
2．迅速放入盛有36℃～37℃水的搪瓷罐中，扣上蓋并不時搖動，盡快解凍。
3．剪開紗布口袋，取出安剖，用70％酒精擦拭消毒后，凈化臺上打開蓋，用吸管吸出細胞懸液，裝入離心管中，再補加10ml培養(yǎng)液，吹打使細胞懸浮。
4．低速離心（500～1000轉(zhuǎn)/分）5分鐘，取上清后再重復(fù)用培養(yǎng)液漂洗、離心。
5．加入培養(yǎng)液適當稀釋后，再移裝入培養(yǎng)瓶中，置溫箱培養(yǎng)，次日更換一次培養(yǎng)液后再繼續(xù)培養(yǎng)。
我公司認為購買細胞的客戶有培養(yǎng)細胞的經(jīng)驗，客戶收到細胞，原瓶里的培養(yǎng)液可以收集繼續(xù)使用，在*次消化傳瓶時，我們要求客戶留一瓶細胞繼續(xù)使用我們的培養(yǎng)液，其它瓶的細胞客戶可使用自己的培養(yǎng)液，這樣可減少由于細胞不適應(yīng)培養(yǎng)液導(dǎo)致的細胞問題。
來源有保障（世界*品牌），狀態(tài)且傳代次數(shù)好，經(jīng)測試不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。每管含有細胞數(shù)>1000000個，具有高品質(zhì)、高純度、高穩(wěn)定性等特點，純化技術(shù)保證產(chǎn)品性能。
運輸方式：活細胞運輸（T-25 flasks）。
細胞純度：95%。
細胞來源：ATCC等。
包裝：內(nèi)層無菌自封袋，防壓泡沫盒，外層防壓保溫氣泡袋，說明書。
用途：本產(chǎn)品只提供給進一步的科研使用，不可應(yīng)用于治療等其他方面。
細胞凍存
１．將細胞消化下來，移入離心管離心，棄上清
２．準備凍存液比例：５０％ＦＢＳ＋４０％培養(yǎng)基＋１０％ＤＭＳＯ（現(xiàn)用現(xiàn)配）
３．加１．５凍存液在離心管中，將細胞吹打均勻，移入凍存管內(nèi)．
放入－２０度冰箱２－４小時后．再放入－８０度冰箱過夜，第二天放入液氮罐保存.
本公司的細胞培養(yǎng)操作規(guī)程，供參考
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備DMEM培養(yǎng)基(DMEM，GIBCO，貨號11965-092)，90%；胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3ml此細胞的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打后吸出，移入15ml離心管中，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.移入到事先準備好的含有5ml培養(yǎng)基的T-25培養(yǎng)瓶中或含有14ml培養(yǎng)基的T-75培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，先要消化處理并進行細胞計數(shù)。消化方法按照細胞傳代方法的1-3步驟進行，zui后的重懸液使用血清。懸浮細胞直接計數(shù)后離心，用血清重懸浮，加DMSO至zui終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。
傳代時間：2-3天 3-5天
傳代比例：1:2~1:3 1:1~1:2
細胞活力：95％（Viability by Trypan Blue Exclusion）
細胞實驗安全性：所有細胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全臺內(nèi)操作，并請注意防護，所有廢液及接觸過此細胞的器皿需高壓滅菌后方能丟棄。收到細胞后，在倒置鏡下(是在4X物鏡)觀察整個細胞生長情況。
研盟生物其他優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品：
小鼠血細胞，WEHI-3
小鼠淋巴瘤細胞(NK靶細胞)，YAC-1
小鼠淋巴細胞白血病，L1210
小鼠淋巴瘤細胞，P388D1(IL-1)
小鼠淋巴瘤細胞，EL4
小鼠淋巴瘤細胞，EL4.IL-2
小鼠淋巴瘤細胞，P388D1
小鼠淋巴瘤細胞，L5178YTK+/-clone(3.7.2C)
小鼠T淋巴細胞，Cl.Ly1+2-/9
小鼠T淋巴瘤細胞，Cyc-Tag(S49)
小鼠T淋巴瘤細胞，E.G7-OVA
小鼠B淋巴細胞，WEHI 231
小鼠巨噬細胞，Ana-1
小鼠漿細胞瘤，MPC-11
小鼠單核巨噬細胞，J774A.1
小鼠單核巨噬細胞白血病細胞，RAW 264.7
細胞名稱：
細胞描述：RKO-E6細胞系是用脂質(zhì)體法轉(zhuǎn)染pCMV-E6的結(jié)腸癌RKO細胞系。 該細胞含有穩(wěn)定整合受控於巨細胞病毒啟動子的人乳tou狀病毒（HPV）E6癌基因。 RKO-E6細胞系和它的母系RKO一起可用于研究p53缺失引起的細胞參數(shù)改變p53介導(dǎo)的轉(zhuǎn)錄和凋亡等。 在本庫通過支原體檢測。 在本庫通過STR檢測。
動物種別：人
組織來源：結(jié)腸癌，轉(zhuǎn)染插入到pCMV中的HPV E6
形態(tài)：上皮細胞
培養(yǎng)基和添加劑：MEM培養(yǎng)基(GIBCO,貨號41500034，添加NaHCO3 1.5g/L，Sodium Pyruvate 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度。
REFERENCE：Oncogene 10: 1053-1059, 1995. PubMed: 7700629 Oncogene 13: 2255-2263, 1996. PubMed: 8950993 J. Biol. Chem. 272: 28989-28993, 1997. PubMed: 9360971
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