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RBL-2H3大鼠嗜堿性細(xì)胞白血病細(xì)胞

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細(xì)胞

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上海研盟生物科技有限公司

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

上海研盟生物提供美國(guó)ATCC傳代細(xì)胞株“RBL-2H3大鼠嗜堿性細(xì)胞白血病細(xì)胞"，進(jìn)口來源，國(guó)內(nèi)保種，活性保證，咨詢：.

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【友情提示】：產(chǎn)品價(jià)格與說明書請(qǐng)?zhí)砑涌头騺黼娫儍r(jià)，索要說明書；

產(chǎn)品名稱：RBL-2H3大鼠嗜堿性細(xì)胞白血病細(xì)胞

細(xì)胞特性

組織來源：外周血；化學(xué)誘變嗜堿性細(xì)胞；白血病
培養(yǎng)條件：MEM +15% FBS(滅活)
形態(tài)：貼壁；成纖維細(xì)胞
背景：RBL-2H3是1978年國(guó)立牙科研究所的免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)室從Wistar大鼠保持腫瘤狀態(tài)的嗜堿性細(xì)胞中分離和克隆出來的嗜堿性白血病細(xì)胞株。這些細(xì)胞具有高親和力的IgE受體。通過集聚這些受體或與鈣離子載體協(xié)同作用可以激活它們分泌組胺及其他遞質(zhì)。這株細(xì)胞廣泛地用于研究肥大細(xì)胞FcERI和分泌的生化途徑。 RBL-2H3細(xì)胞是研究FcERI結(jié)構(gòu)的模型。它們廣泛地用于研究細(xì)胞分泌的不同方面，包括細(xì)胞內(nèi)鈣濃度改變、磷酸脂酶激活、蛋白激酶和小G蛋白的作用。雖然幾乎所有批號(hào)的FBS都支持細(xì)胞的生長(zhǎng)，但在某些批號(hào)中FcERI集聚后脫?；酶谩Ａ硪恢甏笫笫葔A性細(xì)胞株(RBL，ATCC CRL-1378)不會(huì)脫?；?/p>

基本特性：
描述：（1）所有細(xì)胞株購自ATCC；
（2）公司可提供新鮮或凍存細(xì)胞株；
（3）細(xì)胞株數(shù)量約 1000000個(gè)/瓶；
（4）不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌

密度超過90%,并且細(xì)胞狀態(tài)很好時(shí),則復(fù)溫后2個(gè)小時(shí)需要立即傳代，提供復(fù)蘇好的細(xì)胞株，貼壁及懸浮細(xì)胞形式，細(xì)胞狀態(tài)良好，飽滿、光澤度好，*，并提供細(xì)胞報(bào)價(jià)、所需培養(yǎng)基、種屬來源、組織來源、形態(tài)、背景資料等。

RBL-2H3大鼠嗜堿性細(xì)胞白血病細(xì)胞復(fù)蘇方法細(xì)胞用途：僅供科研使用。

1．從液氮罐中取出安剖；有時(shí)因安剖未封嚴(yán)，浸入了液氮，取出后因安剖內(nèi)液氮迅速氣化而發(fā)生爆炸，因此應(yīng)帶有防護(hù)眼睛和手套。

2．迅速放入盛有36℃～37℃水的搪瓷罐中，扣上蓋并不時(shí)搖動(dòng)，盡快解凍。

3．剪開紗布口袋，取出安剖，用70％酒精擦拭消毒后，凈化臺(tái)上打開蓋，用吸管吸出細(xì)胞懸液，裝入離心管中，再補(bǔ)加10ml培養(yǎng)液，吹打使細(xì)胞懸浮。

4．低速離心（500～1000轉(zhuǎn)/分）5分鐘，取上清后再重復(fù)用培養(yǎng)液漂洗、離心。

5．加入培養(yǎng)液適當(dāng)稀釋后，再移裝入培養(yǎng)瓶中，置溫箱培養(yǎng)，次日更換一次培養(yǎng)液后再繼續(xù)培養(yǎng)。

我公司認(rèn)為購買細(xì)胞的客戶有培養(yǎng)細(xì)胞的經(jīng)驗(yàn)，客戶收到細(xì)胞，原瓶里的培養(yǎng)液可以收集繼續(xù)使用，在*次消化傳瓶時(shí)，我們要求客戶留一瓶細(xì)胞繼續(xù)使用我們的培養(yǎng)液，其它瓶的細(xì)胞客戶可使用自己的培養(yǎng)液，這樣可減少由于細(xì)胞不適應(yīng)培養(yǎng)液導(dǎo)致的細(xì)胞問題。

來源有保障（世界*品牌），狀態(tài)且傳代次數(shù)好，經(jīng)測(cè)試不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。每管含有細(xì)胞數(shù)>1000000個(gè)，具有高品質(zhì)、高純度、高穩(wěn)定性等特點(diǎn)，純化技術(shù)保證產(chǎn)品性能。
運(yùn)輸方式：活細(xì)胞運(yùn)輸（T-25 flasks）。
細(xì)胞純度：95%。
細(xì)胞來源：ATCC等。
包裝：內(nèi)層無菌自封袋，防壓泡沫盒，外層防壓保溫氣泡袋，說明書。

用途：本產(chǎn)品只提供給進(jìn)一步的科研使用，不可應(yīng)用于治療等其他方面。

細(xì)胞凍存
１．將細(xì)胞消化下來，移入離心管離心，棄上清
２．準(zhǔn)備凍存液比例：５０％ＦＢＳ＋４０％培養(yǎng)基＋１０％ＤＭＳＯ（現(xiàn)用現(xiàn)配）
３．加１．５凍存液在離心管中，將細(xì)胞吹打均勻，移入凍存管內(nèi)．
放入－２０度冰箱２－４小時(shí)后．再放入－８０度冰箱過夜，第二天放入液氮罐保存.

本公司的細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程，供參考
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備DMEM培養(yǎng)基(DMEM，GIBCO，貨號(hào)11965-092)，90%；胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3ml此細(xì)胞的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打后吸出，移入15ml離心管中，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.移入到事先準(zhǔn)備好的含有5ml培養(yǎng)基的T-25培養(yǎng)瓶中或含有14ml培養(yǎng)基的T-75培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，先要消化處理并進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。消化方法按照細(xì)胞傳代方法的1-3步驟進(jìn)行，zui后的重懸液使用血清。懸浮細(xì)胞直接計(jì)數(shù)后離心，用血清重懸浮，加DMSO至zui終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。

傳代時(shí)間：2-3天 3-5天

傳代比例：1:2~1:3 1:1~1:2

細(xì)胞活力：95％（Viability by Trypan Blue Exclusion）

細(xì)胞實(shí)驗(yàn)安全性：所有細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級(jí)生物安全臺(tái)內(nèi)操作，并請(qǐng)注意防護(hù)，所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需高壓滅菌后方能丟棄。收到細(xì)胞后，在倒置鏡下(是在4X物鏡)觀察整個(gè)細(xì)胞生長(zhǎng)情況。

研盟生物其他優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品：

小鼠雜交瘤細(xì)胞，CD3
小鼠雜交瘤細(xì)胞，CD4
小鼠雜交瘤細(xì)胞，CD8
小鼠雜交瘤細(xì)胞，CHK1
小鼠雜交瘤細(xì)胞，CHUK
小鼠雜交瘤細(xì)胞，CIB1
小鼠雜交瘤細(xì)胞，CK1
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小鼠雜交瘤細(xì)胞，Clenbuterol
小鼠雜交瘤細(xì)胞，CRYAB
小鼠雜交瘤細(xì)胞，cTnI
小鼠雜交瘤細(xì)胞，cTnT2
小鼠雜交瘤細(xì)胞，Cytokeratin 5
小鼠雜交瘤細(xì)胞，Cytokeratin(Pan)
小鼠雜交瘤細(xì)胞，DDR2
小鼠雜交瘤細(xì)胞，Desmin細(xì)胞名稱：PANC-1人胰腺癌細(xì)胞

細(xì)胞名稱：
細(xì)胞描述：RBL-2H3是1978年國(guó)立牙科研究所的免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)室從Wistar大鼠保持腫瘤狀態(tài)的嗜堿性細(xì)胞中分離和克隆出來的嗜堿性白血病細(xì)胞株。這些細(xì)胞具有高親和力的IgE受體。通過集聚這些受體或與鈣離子載體協(xié)同作用可以激活它們分泌組胺及其他遞質(zhì)。這株細(xì)胞廣泛地用于研究肥大細(xì)胞FcERI和分泌的生化途徑。 RBL-2H3細(xì)胞是研究FcERI結(jié)構(gòu)的模型。它們廣泛地用于研究細(xì)胞分泌的不同方面，包括細(xì)胞內(nèi)鈣濃度改變、磷酸脂酶激活、蛋白激酶和小G蛋白的作用。雖然幾乎所有批號(hào)的FBS都支持細(xì)胞的生長(zhǎng)，但在某些批號(hào)中FcERI集聚后脫?；酶?。另一株大鼠嗜堿性細(xì)胞株(RBL，ATCC CRL-1378)不會(huì)脫?；?。在本庫通過支原體檢測(cè)。
動(dòng)物種別：大鼠
組織來源：外周血；化學(xué)誘變嗜堿性細(xì)胞；白血病
形態(tài)：成纖維細(xì)胞
培養(yǎng)基和添加劑：MEM培養(yǎng)基(GIBCO,貨號(hào)41500034，添加NaHCO3 1.5g/L，Sodium Pyruvate 0.11g/L)，85%；優(yōu)質(zhì)熱滅活胎牛血清，15%。氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37攝氏度。
REFERENCE：Kulczycki A Jr. The interaction of IgE with rat basophilic leukemia cells. I. Evidence for specific binding of IgE. J. Exp. Med. 139: 600-616, 1974. PubMed: 4812630 Barsumian EL , et al. IgE-induced histamine release from rat basophilic leukemia cell lines: isolation of releasing and nonreleasing clones. Eur. J. Immunol. 11: 317-323, 1981. PubMed: 6166481 Eccleston E , et al. Basophilic leukaemia in the albino rat and a demonstration of the basopoietin. Nat. New Biol. 244: 73-76, 1973.

關(guān)鍵詞：培養(yǎng)箱顯微鏡

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