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上海研盟生物科技有限公司
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上海研盟生物提供美國ATCC傳代細胞株“人肝癌細胞,BEL-7404細胞"，進口來源，國內保種，活性保證，咨詢：.
【友情提示】：產品價格與說明書請?zhí)砑涌头騺黼娫儍r，索要說明書；
產品名稱：人肝癌細胞,BEL-7404細胞
基本特性：
C細胞數量：1000000個細胞數
E細胞檢測：細胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌
凍存和復蘇原則就是：慢凍、快解凍。因為細胞內主要成分還是水，在-20℃時細胞中的水結成冰晶，而與水相比，冰的密度小而體積大，會造成細胞器膜、細胞膜的損傷，這樣很容易導致細胞復蘇失敗。
細胞名稱：BEL-7404人肝癌細胞
組織來源：肝癌
培養(yǎng)條件：RPMI-1640 +10% FBS
形 態(tài)：貼壁；上皮細胞樣
傳代時間：2-3天 3-5天
傳代比例：1:2~1:3 1:1~1:2
細胞活力：95％（Viability by Trypan Blue Exclusion）
細胞實驗安全性：所有細胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全臺內操作，并請注意防護，所有廢液及接觸過此細胞的器皿需高壓滅菌后方能丟棄。收到細胞后，在倒置鏡下(是在4X物鏡)觀察整個細胞生長情況。
問：我的實驗是分選癌癥干細胞進行基因組分析，因為流式分選出的腫瘤干細胞特別少，只有10的4次方，所以選擇了微量的dna和rna提取試劑盒，試劑盒還沒有到，我打咨詢技術顧問說是把分選的BEL-7404細胞；人肝癌細胞離心后棄去液體凍到-80度的冰箱，但是實驗室一位師兄說這樣不行，rna會降解，我實在不知道該怎么辦了，細胞應該怎么保存，求各位大神指點！還有基因測序對dna和rna要求很高，這么少的細胞提出的dna和rna可以進行測序嗎？
答：細胞如果裂解后，RNA在普通環(huán)境下會很快降解。想要不降解，可以考慮：1.加T-Zol裂解液，-80度保存；2.分選后按細胞凍存步驟凍存，存于-80度，應該能放3-6個月。
人肝癌細胞,BEL-7404細胞復蘇方法
1．從液氮罐中取出安剖；有時因安剖未封嚴，浸入了液氮，取出后因安剖內液氮迅速氣化而發(fā)生爆炸，因此應帶有防護眼睛和手套。
2．迅速放入盛有36℃～37℃水的搪瓷罐中，扣上蓋并不時搖動，盡快解凍。
3．剪開紗布口袋，取出安剖，用70％酒精擦拭消毒后，凈化臺上打開蓋，用吸管吸出細胞懸液，裝入離心管中，再補加10ml培養(yǎng)液，吹打使細胞懸浮。
4．低速離心（500～1000轉/分）5分鐘，取上清后再重復用培養(yǎng)液漂洗、離心。
5．加入培養(yǎng)液適當稀釋后，再移裝入培養(yǎng)瓶中，置溫箱培養(yǎng)，次日更換一次培養(yǎng)液后再繼續(xù)培養(yǎng)。
技術相關問答：
1. 如何選用特殊細胞系培養(yǎng)基？培養(yǎng)某一類型細胞沒有固定的培養(yǎng)條件。在MEM中培養(yǎng)的細胞，很可能在DMEM或M199中同樣很容易生長?？傊?，*MEM做粘附細胞培養(yǎng)、RPMI-1640做懸浮細胞培養(yǎng)是一個好的開始。2. 何時須更換培養(yǎng)基？視細胞生長密度而定， 或遵照細胞株基本數據上之更換時間，按時更換培養(yǎng)基即可。 3. 可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應之細胞培養(yǎng)基， 若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基， 細胞大都無法立即適應， 造成細胞無法存活。4.可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的種類和品質對于細胞的生長會產生*的影響。來自不同物種的血清， 在一些物質或分子的量或內容物上都有所不同，血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
來源有保障（世界*品牌），狀態(tài)且傳代次數好，經測試不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。每管含有細胞數>1000000個，具有高品質、高純度、高穩(wěn)定性等特點，純化技術保證產品性能。
運輸方式：活細胞運輸（T-25 flasks）。
細胞純度：95%。
細胞來源：ATCC等。
包裝：內層無菌自封袋，防壓泡沫盒，外層防壓保溫氣泡袋，說明書。
用途：本產品只提供給進一步的科研使用，不可應用于治療等其他方面。
細胞凍存
１．將細胞消化下來，移入離心管離心，棄上清
２．準備凍存液比例：５０％ＦＢＳ＋４０％培養(yǎng)基＋１０％ＤＭＳＯ（現用現配）
３．加１．５凍存液在離心管中，將細胞吹打均勻，移入凍存管內．
放入－２０度冰箱２－４小時后．再放入－８０度冰箱過夜，第二天放入液氮罐保存.
，體內、外細胞的差異和分化：
1、差異：細胞離體后，失去了神經體液的調節(jié)和細胞間的相互影響，生活在缺乏動態(tài)平衡相對穩(wěn)定環(huán)境，日久天長，易發(fā)生如下變化：分化現象減弱；形態(tài)功能趨于單一化或生存一定時間后衰退死亡；或發(fā)生轉化獲得不死性，變成可無限生長的連續(xù)細胞系或惡性細胞系。因此，培養(yǎng)中的細胞可視為一種在特定的條件下的細胞群體，它們既保持著與體內細胞相同的基本結構和功能，也有一些不同于體內細胞的性狀。實際上從細胞一旦被置于體外培養(yǎng)后，這種差異就開始發(fā)生了。
2、分化：體外培養(yǎng)的細胞分化能力并未*喪失，只是環(huán)境的改變，細胞分化的表現和在體內不同。細胞是否表現分化,關鍵在于是否存在使細胞分化的條件，如Friend細胞（小鼠紅白血病細胞）在一定的因素作用下可以合成血紅蛋白，血管內皮細胞在類似基膜物質底物上培養(yǎng)時能長成血管狀結構，雜交瘤細胞能產生特異的單克隆抗體，這些均屬于細胞分化行為。
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*，HEL
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