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大鼠促甲狀腺素釋放激素（TRH）ELISA試劑盒科研檢測

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產(chǎn)品簡介

“大鼠促甲狀腺素釋放激素（TRH）ELISA試劑盒科研檢測 “進(jìn)口原裝ELISA抗體對組裝，效果*，提供、免費(fèi)代測服務(wù)，咨詢：

詳細(xì)介紹

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大鼠促甲狀腺素釋放激素(TRH)ELISA試劑盒科研檢測

操作步驟
方法一　用于檢測未知抗原的雙抗體夾心法:
1.　包被：用0.05M PH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1～10μg／ml。在每個(gè)聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml，4℃過夜。次日，棄去孔內(nèi)溶液，用洗滌緩沖液洗3次，每次3分鐘。(簡稱洗滌，下同)。
2.　加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中，置37℃孵育1小時(shí)。然后洗滌。(同時(shí)做空白孔，陰性對照孔及陽性對照孔)。
3.　加酶標(biāo)抗體：于各反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃孵育0.5～1小時(shí)，洗滌。
4.　加底物液顯色：于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃10～30分鐘。
5.　終止反應(yīng)：于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。
6.　結(jié)果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結(jié)果：反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深，陽性程度越強(qiáng)，陰性反應(yīng)為無色或極淺，依據(jù)所呈顏色的深淺，以“ "、“-"號表示。也可測O·D值：在ELISA檢測儀上，于450nm(若以ABTS顯色，則410nm)處，以空白對照孔調(diào)零后測各孔O·D值，若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍，即為陽性。
方法二　用于檢測未知抗體的間接法：
用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1～10μg／ml，每孔加0.1ml，4℃過夜。次日洗滌3次。加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時(shí),洗滌。(同時(shí)做空白、陰性及陽性孔對照)于反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體(抗抗體)0.1ml，37℃孵育30-60分鐘，洗滌,zui后一遍用DDW洗滌。其余步驟同“雙抗體夾心法"的4、5、6。

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大鼠促甲狀腺素釋放激素(TRH)ELISA試劑盒科研檢測簡單介紹：

品牌：進(jìn)口/國產(chǎn)

英文名稱：Rat thyrotropin-releasing hormone,TRH Elisa Kit

產(chǎn)品規(guī)格：

48T(48T檢測雙標(biāo)準(zhǔn)的可以檢測37個(gè)樣本，其他有10個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品孔，1個(gè)空白對照。48T檢測單標(biāo)準(zhǔn)可以檢測40個(gè)樣本，其他有7個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品孔，1個(gè)空白對照。 )

96T（96T檢測雙標(biāo)準(zhǔn)的可以檢測85個(gè)樣本，其他有10個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品孔，1個(gè)空白對照。96T檢測單標(biāo)準(zhǔn)可以檢測90個(gè)樣，7個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品控 1個(gè)空白對照。）

產(chǎn)品用途：本試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織勻漿及相關(guān)液體樣本中待測物質(zhì)的含量。

產(chǎn)品特異性：本試劑盒可同時(shí)檢測天然或重組的，且與其他相關(guān)蛋白無交叉反應(yīng)。

使用范圍：僅供科研使用，不得用于臨床。

有效期：6個(gè)月

保存條件：2-8℃

實(shí)驗(yàn)原理：
1.本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中待測物質(zhì)水平。用純化的待測物質(zhì)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入待測物質(zhì)，再與HRP標(biāo)記的待測物質(zhì)抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的待測物質(zhì)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（OD 值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測物質(zhì)濃度。

2. 試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）。往預(yù)先包被待測物質(zhì)捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體，經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的待測物質(zhì)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（OD 值），計(jì)算樣品濃度。

大鼠促甲狀腺素釋放激素(TRH)ELISA試劑盒科研檢測實(shí)驗(yàn)原理

本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中待測物質(zhì)水平。用純化的待測物質(zhì)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入待測物質(zhì)，再與HRP標(biāo)記的待測物質(zhì)抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的待測物質(zhì)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD 值)，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測物質(zhì)濃度。

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