SK-OV-3細(xì)胞（說明書索?。?/h1>

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觀察了心肌缺氧再給氧損傷的一氧化氮(nitric oxide, NO)和氧自由基機(jī)制. 

新生Wistar大鼠心肌細(xì)胞置于95% N2/5% CO2環(huán)境培養(yǎng)24 h, 然后置于95% O2 /5% CO2環(huán)境培養(yǎng)4h造成缺氧再給氧心肌細(xì)胞損傷模型. 

單純?nèi)毖踅M心肌細(xì)胞置于95% N2/5% CO2環(huán)境培養(yǎng)24 h, 但不再給氧. 

NO供體硝普鈉(SNP, 5 μmol/L)、NO合酶抑制劑Nω-硝基-L-精氨酸甲酯(L-NAME, 100μmol/L)和其異構(gòu)體Nω-硝基-D-精氨酸甲酯(D-NAME, 100μmol/L)以及超氧化物歧化酶/過氧化氫酶(SOD/CAT, 各100 U/mL)分別于缺氧前加入培養(yǎng)基. 

正常對(duì)照組心肌細(xì)胞置于95% 空氣/5% CO2環(huán)境下培養(yǎng). 結(jié)果顯示, 缺氧24 h能增加培養(yǎng)介質(zhì)中NO, 硫代巴比妥酸反應(yīng)產(chǎn)物(TBARS)和乳酸脫氫酶(LDH)水平, 再給氧降低培養(yǎng)介質(zhì)中NO和水平, 增加TBARS和LDH水平. 

缺氧上調(diào)bcl-2, p53和p21/waf1/cip1蛋白表達(dá)水平, 而再給氧下調(diào)bcl-2蛋白表達(dá)水平, 上調(diào)p53和p21/waf1/cip1蛋白表達(dá)水平. 

同時(shí), 缺氧增加心肌細(xì)胞凋亡率, 而再給氧增加心肌細(xì)胞壞死率. NO供體硝普鈉(SNP)增加培養(yǎng)介質(zhì)中和TBARS水平, 下調(diào)bcl-2蛋白表達(dá)而上調(diào)p53和p21/waf1/cip1蛋白表達(dá)水平, 增加DNA斷裂、凋亡及壞死細(xì)胞率. 

L-NAME和 SOD/CAT分別降低培養(yǎng)介質(zhì)中和TBARS水平, 它們均能上調(diào)bcl-2蛋白表達(dá)而下調(diào)p53和p21/waf1/cip1蛋白表達(dá)水平, 抑制DNA斷裂、凋亡及壞死細(xì)胞率, 而D-NAME則無此作用. 

以上結(jié)果表明, 在缺氧再給氧所致心肌細(xì)胞死亡過程中, NO和氧自由基參與下調(diào)bcl-2蛋白表達(dá)水平和上調(diào)p53和p21/waf1/cip1蛋白表達(dá)水平, 相應(yīng)地激發(fā)細(xì)胞凋亡程序, 并提示一氧化氮及氧自由基誘導(dǎo)心肌細(xì)胞凋亡的機(jī)制與調(diào)節(jié) bcl-2, p53和p21/waf1/cip1信號(hào)通路有關(guān).

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