細(xì)胞：HSC3細(xì)胞
中文名稱：人舌鱗癌細(xì)胞
生長(zhǎng)特性：貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)基：DMEM-H +10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件：50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請(qǐng)嚴(yán)格遵照無(wú)菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS 緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次，加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間，通常控制在 1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰_酶，加 6~8ml 培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層，盡量把細(xì)胞層吹落，吹散。
3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況，定期換液(每周 2-3 次)，待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項(xiàng)操作或凍存。
(網(wǎng)絡(luò)信息主針對(duì)網(wǎng)絡(luò)推廣作用，僅供參考，細(xì)胞培養(yǎng)請(qǐng)咨詢細(xì)胞庫(kù)管理員，以細(xì)胞庫(kù)管理員提供給您的信息為準(zhǔn)，操作前，如果有不明白之處，先咨詢細(xì)胞庫(kù)管理員，避免不必要的損失；)
胚胎干細(xì)胞信號(hào)途徑研究新發(fā)現(xiàn)
研究發(fā)現(xiàn)Wnt和TGF-β信號(hào)途徑是離體條件下使用胚胎干細(xì)胞來(lái)誘導(dǎo)形成原條(primitive streak，亦稱原線，是鳥(niǎo)類和哺乳類發(fā)育初期的胚盤(pán)上先于器官原基在明區(qū)內(nèi)暫時(shí)出現(xiàn)的，沿中線走行的線條狀隆起)所必須的。
發(fā)育動(dòng)物中，原條的形成和它衍生的胚層(中胚層和內(nèi)胚層)是許多組織形成的先決條件。
K562細(xì)胞 白血病細(xì)胞種屬：人、LNCaP細(xì)胞 前列腺癌細(xì)胞種屬：人
為了在離體條件下模擬這些發(fā)育階段，研究使用了一種胚胎干細(xì)胞。除了表達(dá)來(lái)源于brachyuri基因座的GFP蛋白，這種細(xì)胞還表達(dá)來(lái)自foxa2基因座的CD4。，一種表達(dá)不同水平的CD4-Foxa2的GFP-Bry+細(xì)胞群體因這種胚胎干細(xì)胞系的分化而形成。
對(duì)基因表達(dá)模式和發(fā)育潛力的分析表明CD4-Foxa2hiGFP-Bry+細(xì)胞群表現(xiàn)出了早期原條的特征，而CD4-Foxa2loGFP-Bry+細(xì)胞則像晚期原條。
MOLT-4細(xì)胞 白血病細(xì)胞種屬：人、MRC-5細(xì)胞 成纖維細(xì)胞種屬：人
利用這種模型，研究證實(shí)Wnt和TGF-β/nodal/activin信號(hào)途徑都是產(chǎn)生CD4-Foxa2+gfp-Bry+細(xì)胞所必須的。Wnt或低水平的acitvin能誘導(dǎo)出一種后期的原條細(xì)胞群，而高水平的actinvin則誘導(dǎo)形成一種早期的原條細(xì)胞。
MEL細(xì)胞 白血病細(xì)胞種屬:小鼠、MCF 7B細(xì)胞 腺癌細(xì)胞種屬：人
最終，研究發(fā)現(xiàn)持續(xù)的activin信號(hào)能夠刺激CD4-Foxa2+GFP-Bry+胚胎干細(xì)胞群形成內(nèi)胚層。這些發(fā)現(xiàn)表明，與胚胎中胚層誘導(dǎo)有關(guān)的發(fā)育事件能夠在胚胎干細(xì)胞模型中重現(xiàn)，并因此了解到與內(nèi)胚層和中胚層形成有關(guān)的信號(hào)途徑。
