細胞:GC-2 spd細胞
中文名稱:小鼠精母細胞系
生長特性:貼壁細胞
培養(yǎng)基:1640 培養(yǎng)基 血清:10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請嚴格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS 緩沖液潤洗細胞兩次,加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進行消化細胞(注意把握消化時間,通??刂圃?1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰_酶,加 6~8ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散。
3. 取部分細胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當?shù)呐囵B(yǎng)基,把細胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細胞密度達到 80%以后重復 1 項操作或凍存。
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幫助刺激人類胚胎干細胞更高效地分化成其他類型的細胞。
胚胎干細胞是人體中保留的未成熟細胞,具有再分化形成其他細胞和組織器官的潛力。利用胚胎干細胞培育供移植用的細胞、組織或器官,據(jù)認為在醫(yī)療上具有重要價值。
但是刺激干細胞在體外進行分化并非易事,這一過程受到很多因素限制。比如,干細胞在體外賴以生長的材料,對干細胞的習性會產(chǎn)生影響。
某種特定生物材料究竟會如何影響干細胞習性,此前并沒有什么快速簡便的辦法能夠加以評估。經(jīng)研究后在這方面取得了重要進展。他們開發(fā)出的新技術,可以幫助科學家同時測試成百上千種不同材料刺激干細胞分化的效果。
這種新技術首先將生物材料沉積到一個玻璃載片上。數(shù)百種材料分別在75毫米長、25毫米寬的載片1700多個點上沉積,位于各點的生物材料經(jīng)紫外線處理后會發(fā)生聚合而變硬。
科學家隨后將人類胚胎干細胞“播種”到玻璃載片上,并將載片放入包含生長因子等的不同溶液中,以觀察何種生物材料最利于刺激干細胞生長。利用該辦法發(fā)現(xiàn)了一些生物材料。測試顯示,這些材料可刺激人類胚胎干細胞分化成高純度的上皮細胞。