細胞：DF-1細胞
中文名稱：雞胚成纖維細胞
生長特性：貼壁細胞
培養(yǎng)基：DMEM-H +10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件：50%基礎培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請嚴格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS 緩沖液潤洗細胞兩次，加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進行消化細胞(注意把握消化時間，通?？刂圃?1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況，在細胞邊緣縮小，貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰_酶，加 6~8ml 培養(yǎng)基，輕輕吹打細胞層，盡量把細胞層吹落，吹散。
3. 取部分細胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當?shù)呐囵B(yǎng)基，把細胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況，定期換液(每周 2-3 次)，待細胞密度達到 80%以后重復 1 項操作或凍存。
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通過對藍豬耳(Torenia fournieri)活體胚囊的研究, 發(fā)現(xiàn)中央細胞和初生胚乳細胞中的微絲骨架在細胞核遷移時發(fā)生了顯著的變化.
授粉前, 微絲在中央細胞的周質(zhì)位置呈現(xiàn)短束狀隨機分布. 開花兩天后, 它們組裝成截然不同的微絲網(wǎng)絡, 在這個階段, 次生核位于中央細胞中央位置并與短束狀的微絲列陣.
在授粉發(fā)生后不久, 分布在珠孔端的微絲發(fā)生片斷化, 此時次生核與卵器相鄰.
受精后, 初生胚乳細胞核從卵細胞處移開, 在初生胚乳細胞中微絲又重組形成清晰的網(wǎng)絡結(jié)構(gòu).
用latrunculin A (LAT-A)和細胞松弛素B(cytochalasin B, CB)破壞微絲骨架, 得到的試驗結(jié)果說明, 微絲參與了中央細胞中的細胞核遷移運動. 數(shù)據(jù)也表明, 在受精過程中, 微絲骨架的動力學特性在中央細胞和初生胚乳細胞的胞質(zhì)重組中起重要作用.
