細(xì)胞：C1A-FLS細(xì)胞
中文名稱：大鼠滑膜成纖維細(xì)胞
生長(zhǎng)特性：貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)基：DMEM-H +10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件：50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請(qǐng)嚴(yán)格遵照無(wú)菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS 緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次，加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間，通?？刂圃?1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰_酶，加 6~8ml 培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層，盡量把細(xì)胞層吹落，吹散。
3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況，定期換液(每周 2-3 次)，待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項(xiàng)操作或凍存。
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發(fā)現(xiàn)使干細(xì)胞發(fā)育成神經(jīng)細(xì)胞物質(zhì)
胚胎干細(xì)胞是一種“原初細(xì)胞”，它能夠分化成肌細(xì)胞、血細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞等不同細(xì)胞，進(jìn)而發(fā)育成各種器官。
這種分化功能使胚胎干細(xì)胞具備了巨大的醫(yī)療應(yīng)用潛力。胚胎干細(xì)胞要在分化因素的作用下，才能分化成特定的細(xì)胞。
過(guò)去只在細(xì)胞核層次上觀察到了影響胚胎干細(xì)胞分化方向的因素，比如某些酸成分作用于老鼠胚胎干細(xì)胞核，可以使其干細(xì)胞變成造血細(xì)胞、骨細(xì)胞等。
他們最近發(fā)現(xiàn)了胚胎干細(xì)胞中能與外來(lái)物質(zhì)結(jié)合、影響分化方向的蛋白質(zhì)受體。
在蛋白質(zhì)層次上觀察到與干細(xì)胞分化有關(guān)的因素。實(shí)驗(yàn)還表明，兩種分別名為VIP和PACAP的肽能夠與胚胎干細(xì)胞中的蛋白質(zhì)受體結(jié)合，促使干細(xì)胞發(fā)育成神經(jīng)細(xì)胞。
此前的研究已證實(shí)，這兩種肽主要存在于人腦中，可以促進(jìn)小腦的形成和發(fā)育，早期的胚胎含有這兩種物質(zhì)。
將這兩種肽作用于老鼠胚胎干細(xì)胞中的G蛋白質(zhì)受體后，發(fā)現(xiàn)這兩種肽的含量越高，胚胎干細(xì)胞分化出的神經(jīng)細(xì)胞就越多，這些神經(jīng)細(xì)胞最后發(fā)展成了神經(jīng)組織。
專家由此認(rèn)定，在蛋白質(zhì)層次上，VIP和PACAP肽是影響胚胎干細(xì)胞分化為神經(jīng)細(xì)胞的因素，G蛋白質(zhì)受體是干細(xì)胞中負(fù)責(zé)接收這兩種肽的起誘導(dǎo)作用的受體。
專家指出，有關(guān)研究還需要進(jìn)一步深入，以確定能否更有針對(duì)性地利用特定的肽，來(lái)誘導(dǎo)胚胎干細(xì)胞形成特定的神經(jīng)細(xì)胞。
