細(xì)胞：ZR-75-30細(xì)胞
中文名稱：人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞
生長特性：貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)基：1640 培養(yǎng)基 血清：10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件：50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請嚴(yán)格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS 緩沖液潤洗細(xì)胞兩次，加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間，通常控制在 1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰_酶，加 6~8ml 培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層，盡量把細(xì)胞層吹落，吹散。
3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況，定期換液(每周 2-3 次)，待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項(xiàng)操作或凍存。
(網(wǎng)絡(luò)信息主針對網(wǎng)絡(luò)推廣作用，僅供參考，細(xì)胞培養(yǎng)請咨詢細(xì)胞庫管理員，以細(xì)胞庫管理員提供給您的信息為準(zhǔn)，操作前，如果有不明白之處，先咨詢細(xì)胞庫管理員，避免不必要的損失；)
腫瘤基因組穩(wěn)定性新機(jī)制
一個(gè)細(xì)胞分裂(cell pision)繁殖一次，它所有的DNA就要復(fù)制一次。而DNA復(fù)制的工具受損，或引起DNA修復(fù)損傷則可導(dǎo)致DNA復(fù)制壓力。
腫瘤細(xì)胞繁殖的速度快，要在更短的時(shí)間內(nèi)繁殖同樣數(shù)量的DNA，引起復(fù)制損傷的幾率就更大。
在此前的研究中，該研究組曾發(fā)現(xiàn)了染色體斷裂的機(jī)制，染色體“脆性位點(diǎn)”(基因組特定區(qū)域)在細(xì)胞分裂(cell pision)期顯示為間隙或不連續(xù)的間隔區(qū)，脆性位點(diǎn)在物種間保守，且該區(qū)域染色體易斷裂，推測其對腫瘤相關(guān)聯(lián)的錯(cuò)誤基因組重排有影響。
健康的細(xì)胞基因組是穩(wěn)定的，基因組重排是導(dǎo)致健康細(xì)胞轉(zhuǎn)化為腫瘤細(xì)胞的一個(gè)重要因素之一；反過來，腫瘤細(xì)胞又需要基因組的穩(wěn)定性，否則腫瘤細(xì)胞就會死亡。”應(yīng)頌敏說。
根據(jù)這項(xiàng)研究，腫瘤細(xì)胞用M期的修復(fù)機(jī)制維持了基因組的穩(wěn)定性，以滿足其存活和快速增殖的需要。
在腫瘤細(xì)胞中，癌基因誘導(dǎo)了DNA復(fù)制壓力，異常增殖的腫瘤細(xì)胞由于存在DNA復(fù)制壓力，它在“規(guī)定動作”的S期進(jìn)行的DNA復(fù)制留下了很多的DNA損傷，使得DNA變得很不穩(wěn)定，導(dǎo)致了腫瘤細(xì)胞的基因組不穩(wěn)定性，進(jìn)而驅(qū)動癌變。
近年來，肺癌等惡性腫瘤(malignant tumor)發(fā)病率不斷升高，目前的放療、化療等腫瘤治療手段對正常細(xì)胞傷害巨大。
有絲分裂期DNA復(fù)制的發(fā)現(xiàn)對包括核酸修復(fù)、復(fù)制和腫瘤等許多領(lǐng)域的研究將產(chǎn)生重要影響。
該發(fā)現(xiàn)是對脆性位點(diǎn)機(jī)制的重新審視，即脆性位點(diǎn)并非染色體真正斷裂，而是細(xì)胞分裂(cell pision)期新合成的DNA區(qū)域，它之所以看起來像斷裂，是因?yàn)樾潞铣傻腄NA區(qū)域與染色體其他區(qū)域連接不緊密。
