細胞:Hep-3B細胞
中文名稱:人肝癌細胞
生長特性:貼壁細胞
培養(yǎng)基:DMEM-H +10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請嚴格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS 緩沖液潤洗細胞兩次,加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進行消化細胞(注意把握消化時間,通??刂圃?1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰_酶,加 6~8ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散。
3. 取部分細胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當?shù)呐囵B(yǎng)基,把細胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細胞密度達到 80%以后重復(fù) 1 項操作或凍存。
(網(wǎng)絡(luò)信息主針對網(wǎng)絡(luò)推廣作用,僅供參考,細胞培養(yǎng)請咨詢細胞庫管理員,以細胞庫管理員提供給您的信息為準,操作前,如果有不明白之處,先咨詢細胞庫管理員,避免不必要的損失;)
在艾滋病(AIDS)面前,嚙齒動物似乎比人類更為強大。大鼠和小鼠對人體免疫缺損病毒(HIV)具有天生的抵抗能力——這一情況也導(dǎo)致研究人員尋找一種AIDS小型動物模型的夙愿一直無法實現(xiàn)。
然而發(fā)現(xiàn),一種經(jīng)過基因改造的小鼠很容易感染HIV,這就為AIDS藥物的研制提供了新的幫助。
通過加入能夠使人類具有易感性的多種基因化合物,一直在嘗試培育可感染HIV的嚙齒動物,然而進展極為緩慢。
向小鼠體內(nèi)移植了兩種人類攜帶的關(guān)鍵分子——病毒用它們來傳染免疫細胞,其表面受體為CD4和CCR5。但是HIV在這些動物體內(nèi)并不能有效地進行自我復(fù)制,從而導(dǎo)致病毒數(shù)量低于其在人體中的水平。
這一復(fù)制過程是許多有效抗HIV藥物——例如蛋白酶抑制劑——的靶點,而這一小鼠模型尚無法評估此類化合物。也正是由于這些限制,這一模型對于研究HIV究竟如何導(dǎo)致AIDS亦作用有限。
向這些經(jīng)過改造的小鼠中添加新的基因,從而避開這些殘留的障礙。并不認為這一模型在所有情況下都適用。
這種小鼠是否能夠用來評估那些在HIV開始自我復(fù)制之前就對其進行打擊的AIDS藥物。研究人員利用兩種已經(jīng)批準上市的藥物——T-20,能夠阻止HIV進入細胞;
Sustiva,抑制病毒核糖核酸(RNA)轉(zhuǎn)變成脫氧核糖核酸(DNA)所必需的逆轉(zhuǎn)錄過程——對這種小鼠進行了測試。
與人類的情況類似,在這兩項試驗中,經(jīng)過基因改造的小鼠體內(nèi)的HIV水平下降了90%。試驗直接導(dǎo)致小鼠免疫細胞數(shù)量的減少,這點也與人類試驗一致。