細(xì)胞:SK-MES-1細(xì)胞
中文名稱:人肺鱗癌細(xì)胞
生長特性:貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)基:MEM+10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請嚴(yán)格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS 緩沖液潤洗細(xì)胞兩次,加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時間,通??刂圃?1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰_酶,加 6~8ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散。
3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項(xiàng)操作或凍存。
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一極_端厭氧菌基因組測序完成
Syntrophus aciditrophicus是一種極_端厭氧菌,用以維持生命的食物非常簡單,是為數(shù)不多的能夠降解有機(jī)物脂肪酸的生命形式,在全球碳循環(huán)中發(fā)揮關(guān)鍵作用。
研究完成其基因組測序工作,共鑒別出3169個基因。
大多數(shù)生命利用氧降解有機(jī)物獲得能量,反應(yīng)過程中產(chǎn)生的電子驅(qū)動儲存能量的ATP生成。Syntrophus是極_端厭氧菌,不能進(jìn)行氧化作用,其電子流動方向與氧化作用中的電子傳遞方向相反,反應(yīng)耗能、產(chǎn)生氫和甲酸鹽(formate)。
因此如果沒有消耗氫和甲酸鹽、產(chǎn)能的其它細(xì)菌幫助,Syntrophus不能生存。
鑒別出幾個Syntrophus參與反向電子轉(zhuǎn)移(耗能)的基因,進(jìn)一步打算研究這種機(jī)制。如果能夠弄清這種‘互養(yǎng)共棲新陳代謝’,也許就能提高從廢物中獲取的氫量,實(shí)現(xiàn)生物氫生產(chǎn)。