細(xì)胞:H9C2細(xì)胞
中文名稱:大鼠心肌細(xì)胞
生長(zhǎng)特性:貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)基:DMEM-H +10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請(qǐng)嚴(yán)格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS 緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次,加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間,通??刂圃?1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰_酶,加 6~8ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散。
3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項(xiàng)操作或凍存。
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花瓣凋零,還能“化作春泥更護(hù)花”。
自然界也不盡是這種良性循環(huán)。研究發(fā)現(xiàn),動(dòng)物的黏膜細(xì)胞在凋亡后,可能刺激免疫系統(tǒng)(immune system)“過度反應(yīng)”,誘發(fā)自身免疫性疾病和過敏性疾病。
腸道、皮膚等處的黏膜被上皮細(xì)胞覆蓋,內(nèi)部產(chǎn)生新細(xì)胞的同時(shí),老細(xì)胞會(huì)凋亡剝落,并隨著糞便、痰或皮膚污垢被排至體外。
此前并未發(fā)現(xiàn)這些“被淘汰”的細(xì)胞會(huì)對(duì)機(jī)體產(chǎn)生哪些影響。
黏膜上皮細(xì)胞凋亡(Apoptosis)后,表面會(huì)出現(xiàn)磷脂質(zhì),這種脂類會(huì)與腸道、氣管和皮膚等處免疫細(xì)胞表面一種稱為“CD300a”的受體蛋白質(zhì)結(jié)合,觸發(fā)免疫反應(yīng),誘發(fā)自身免疫性疾病惡化。
研究人員通過動(dòng)物實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),凋亡的上皮細(xì)胞與這種受體蛋白質(zhì)結(jié)合后,腸道、皮膚、氣管等黏膜組織中“調(diào)控性T細(xì)胞”的數(shù)目減少,而這種免疫細(xì)胞具有遏制炎癥的作用。
這一研究成果將來有助于為一系列自身免疫性疾病和過敏性疾病提供新的治療手段。