細(xì)胞:SW579細(xì)胞
中文名稱:人甲狀腺鱗癌細(xì)胞
生長特性:貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)基:1640 培養(yǎng)基 血清:10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請嚴(yán)格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS 緩沖液潤洗細(xì)胞兩次,加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時間,通??刂圃?1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰_酶,加 6~8ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散。
3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項操作或凍存。
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神經(jīng)系統(tǒng)調(diào)節(jié)衰老
在線蟲體內(nèi)的所有神經(jīng)遞質(zhì)中,僅有抑制性神經(jīng)遞質(zhì)GABA的缺失突變能夠顯著延長壽命。
這一效應(yīng)是由GABA的代謝型受體GABAB受體的GBB-1亞基所介導(dǎo),并通過下游的G蛋白,PLCβ、PKD以及FOXO轉(zhuǎn)錄因子DAF-16發(fā)揮作用。
哺乳動物的GABAB受體能夠替代線蟲體內(nèi)的GBB-1亞基發(fā)揮類似的壽命調(diào)節(jié)作用,給過表達(dá)大鼠GABAB受體的線蟲喂食大鼠GABAB受體的兩種拮抗劑均能顯著延長線蟲壽命。
該研究不僅發(fā)現(xiàn)了神經(jīng)系統(tǒng)中神經(jīng)遞質(zhì)調(diào)控壽命的新功能,而且提示這種功能在不同物種間的保守性,為針對GABAB受體這一熱門藥物靶點進(jìn)行抗衰老藥物開發(fā)提供了新思路。