細胞:CV-1細胞
中文名稱:非洲綠猴腎細胞
生長特性:貼壁細胞
培養(yǎng)基:1640 培養(yǎng)基 血清:10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請嚴格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS 緩沖液潤洗細胞兩次,加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進行消化細胞(注意把握消化時間,通??刂圃?1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰_酶,加 6~8ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散。
3. 取部分細胞懸液轉移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當的培養(yǎng)基,把細胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細胞密度達到 80%以后重復 1 項操作或凍存。
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過去觀察到的干細胞于體內的分化現象可能只是來自于這些干細胞與體內一般的細胞融合而成。這使得成體的干細胞有能力分化成為各種不同的組織此種理論遭到重大質疑,且暗示了干細胞作為治療手段時對健康影響的不確定性。
近期有許多報告指出,從一個組織中取出的干細胞有能力分化為其它組織的細胞。例如造血干細胞可能可以分化為神經細胞、肌肉細胞、心肌細胞等??茖W界也對這些現象可能帶來的修復受損器官的醫(yī)療潛力非常感興趣。
這些觀察到的分化現象,可能只是來自于干細胞和體細胞融合,產生了帶有干細胞分子標志的體細胞,使得科學家誤以為是干細胞分化成了體細胞。
例如在報告中指出,將帶有GFP的腦細胞和胚胎干細胞一同培養(yǎng),結果竟然觀察到了帶有GFP的胚胎干細胞,且這些細胞為四倍體,證實了融合的存在。
不過雖然證明了融合的現象存在,但目前仍不知道這種現象在過去觀察到的干細胞分化現象中占多重要的地位。
然而,由于這些融合后的細胞帶有四套染色體且對個體健康的影響不明,因此這些結果也對那些想要將干細胞的潛力用于治療的人提出了一項警告:在真正應用于臨床以前,對干細胞的安全性問題還需要更多研究.