細(xì)胞：CV-1細(xì)胞
中文名稱(chēng)：非洲綠猴腎細(xì)胞
生長(zhǎng)特性：貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)基：1640 培養(yǎng)基 血清：10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件：50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請(qǐng)嚴(yán)格遵照無(wú)菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS 緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次，加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間，通?？刂圃?1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰_酶，加 6~8ml 培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層，盡量把細(xì)胞層吹落，吹散。
3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況，定期換液(每周 2-3 次)，待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項(xiàng)操作或凍存。
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過(guò)去觀察到的干細(xì)胞于體內(nèi)的分化現(xiàn)象可能只是來(lái)自于這些干細(xì)胞與體內(nèi)一般的細(xì)胞融合而成。這使得成體的干細(xì)胞有能力分化成為各種不同的組織此種理論遭到重大質(zhì)疑，且暗示了干細(xì)胞作為治療手段時(shí)對(duì)健康影響的不確定性。
近期有許多報(bào)告指出，從一個(gè)組織中取出的干細(xì)胞有能力分化為其它組織的細(xì)胞。例如造血干細(xì)胞可能可以分化為神經(jīng)細(xì)胞、肌肉細(xì)胞、心肌細(xì)胞等。科學(xué)界也對(duì)這些現(xiàn)象可能帶來(lái)的修復(fù)受損器官的醫(yī)療潛力非常感興趣。
這些觀察到的分化現(xiàn)象，可能只是來(lái)自于干細(xì)胞和體細(xì)胞融合，產(chǎn)生了帶有干細(xì)胞分子標(biāo)志的體細(xì)胞，使得科學(xué)家誤以為是干細(xì)胞分化成了體細(xì)胞。
例如在報(bào)告中指出，將帶有GFP的腦細(xì)胞和胚胎干細(xì)胞一同培養(yǎng)，結(jié)果竟然觀察到了帶有GFP的胚胎干細(xì)胞，且這些細(xì)胞為四倍體，證實(shí)了融合的存在。
不過(guò)雖然證明了融合的現(xiàn)象存在，但目前仍不知道這種現(xiàn)象在過(guò)去觀察到的干細(xì)胞分化現(xiàn)象中占多重要的地位。
然而，由于這些融合后的細(xì)胞帶有四套染色體且對(duì)個(gè)體健康的影響不明，因此這些結(jié)果也對(duì)那些想要將干細(xì)胞的潛力用于治療的人提出了一項(xiàng)警告：在真正應(yīng)用于臨床以前，對(duì)干細(xì)胞的安全性問(wèn)題還需要更多研究.
