細(xì)胞:TT細(xì)胞
中文名稱:人髓狀甲狀腺導(dǎo)管腫瘤細(xì)胞
生長(zhǎng)特性:貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)基:1640 培養(yǎng)基 血清:10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請(qǐng)嚴(yán)格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS 緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次,加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間,通常控制在 1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰_酶,加 6~8ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散。
3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項(xiàng)操作或凍存。
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新的心肌細(xì)胞可以低速率生成,表明了心臟干細(xì)胞的存在。但對(duì)于這些細(xì)胞的起源卻并不清楚。排列于血管上內(nèi)皮細(xì)胞可能有潛力生成新的心肌細(xì)胞。在發(fā)育過程中內(nèi)皮細(xì)胞可生成包括血細(xì)胞在內(nèi)的其他細(xì)胞類型。
利用在小鼠模型中“追蹤”細(xì)胞,證實(shí)冠狀動(dòng)脈中的內(nèi)皮細(xì)胞可以生成健康心臟中的新心肌細(xì)胞。發(fā)現(xiàn)在冠狀動(dòng)脈中有兩種心臟干細(xì)胞群:靜息的心臟干細(xì)胞群位于血管中膜層,增殖心臟干細(xì)胞群位于血管外膜層。
發(fā)現(xiàn)冠狀動(dòng)脈充當(dāng)了心臟干細(xì)胞的“微環(huán)境”具有有趣的含義。冠狀動(dòng)脈病會(huì)影響這一微環(huán)境。冠狀動(dòng)脈病不僅可以阻斷動(dòng)脈,引起心臟病發(fā)作,還可通過影響心臟維持和再生的途經(jīng)來導(dǎo)致心力衰竭。
在以往的研究中,內(nèi)皮細(xì)胞可生成一些產(chǎn)生瘢痕組織的成纖維細(xì)胞??雌饋硐嗤膬?nèi)皮系統(tǒng)在穩(wěn)態(tài)過程中生成了肌細(xì)胞,并在心肌梗死后轉(zhuǎn)換生成了瘢痕組織。損傷之后,再生轉(zhuǎn)向了纖維化。
了解這種轉(zhuǎn)換有可能促成一些新的策略,在心臟病發(fā)作后、衰老過程中或在諸如糖尿病及高血壓等疾病中再生和生成新的心肌。
如果可以了解損傷后發(fā)生的這種命運(yùn)轉(zhuǎn)換的分子調(diào)控機(jī)制,或許就可以采用某種化合物或藥物來恢復(fù)再生,生成肌肉而不是瘢痕。我們認(rèn)為這是一次機(jī)會(huì)來改善我們對(duì)心肌梗死后來到診所的患者的治療方式。